A-431细胞

实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

产品名称：皮肤鳞癌细胞；A-431
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：该细胞源自一位患有皮肤鳞状细胞癌的85岁女性，是GiardDJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞在抑制小鼠体内可成瘤，在琼脂上培养可形成克隆；是一个超三倍体人细胞株。

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法：1：2传代

公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
水质总有机碳标样 浓度范围:（24.4±1.5）mg/l分析标准品Anti-CC16/FITC  荧光素标记克拉拉蛋白(Clara蛋白)抗体IgG鸡集蛋白亚家族成员11(COLEC11)酶联吸附测定试剂盒

中有机农药混合标样分析标准品Anti-CCK8/FITC  荧光素标记胆囊收缩素/缩胆囊素抗体(八肽)鸡吡哆激酶(PDXK)酶联吸附测定试剂盒

中有机农药混合标样 分析标准品Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC  荧光素标记嗜粒趋化蛋白CCL1抗体IgG鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联吸附测定试剂盒

五酚标准溶液776mg/L,溶剂:Anti-CCL3/MIP-1 Alpha/FITC  荧光素标记巨噬炎性蛋白1α抗体IgG鸡谷胱甘肽S转移酶ω1(GSTω1)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液1.35-4.29mg/L,水质分析用Anti-CCL4/MIP-1 Beta/FITC  荧光素标记巨噬炎性蛋白1β抗体IgG鸡生长分化因子11(GDF11)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液 500mg/L，溶剂：水Anti-CCL5/RANTES/FITC  荧光素标记调节活化的正常T表达和的因子IgG鸡白分化抗原30配体(CD30L)酶联吸附测定试剂盒

间三酚标准溶液 1000μg/ml，溶剂：Anti-CCL6/C10/FITC  荧光素标记嗜粒趋化蛋白CCL6抗体IgG鸡组织转谷氨酰酶(TGM2)酶联吸附测定试剂盒

对硫标准溶液 500μg/ml，溶剂：Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC  荧光素标记巨噬炎症蛋白-1γ抗体IgG鸡纤维蛋白(FBL)酶联吸附测定试剂盒

中对硫标样 分析标准品Anti-CCL11/FITC  荧光素标记嗜粒趋化蛋白抗体IgG鸡糖链抗原153(CA153)酶联吸附测定试剂盒

对硫标准溶液500μg/ml，溶剂：（剧品）Anti-CCL12/MCP-5/FITC  荧光素标记单核趋化蛋白5抗体IgG鸡G蛋白信号调节蛋白4(RGS4)酶联吸附测定试剂盒

中对硫标样 分析标准品（剧品）Anti-CCL13/MCP-4/FITC  荧光素标记单核趋化蛋白4抗体IgG鸡补体片断5b(C5b)酶联吸附测定试剂盒

多联(Aroclor 1248)标准溶液98.6μg/mlAnti-CCL14/HCC-1/FITC  荧光素标记嗜粒趋化蛋白14抗体IgG鸡生长调节致癌因γ(GROγ)酶联吸附测定试剂盒  

多联(Aroclor 1221)标准溶液Anti-CYLD/cylindromatosis 1/FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠微管结合蛋白CYLD抗体IgG鸡Runt相关转录因子2(RUNX2)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液 500mg/L，溶剂：水Anti-phospho-CYLD(Ser418) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化微管结合蛋白CYLD抗体IgG鸡白介素6(IL-6)酶联吸附测定试剂盒

酚标准溶液 500ml/L，溶剂：水Anti-CCL15/MIP5/FITC  荧光素标记巨噬炎性蛋白15IgG鸡卷曲同源物8(FZD8)酶联吸附测定试剂盒
A-431细胞糖转运蛋白Elisa试剂盒c-Jun氨末端激酶1/3多肽抗原Jun B  活化蛋白激酶B抗体

单糖转运蛋白Elisa试剂盒化氨末端激酶1/2/3（pJNK1/2/3）抗原JNK3/MAPK10  氨末端激酶3抗体

马铃薯病YElisa试剂盒Ki-67 AntigenJNK2  氨末端激酶2抗体

马铃薯病AElisa试剂盒肠道内富含的Kruppel样因子抗原JNK1/3  氨末端激酶1/3抗体

马铃薯病SElisa试剂盒化肠道内富含的Kruppel样因子5抗原JNK1/2/3  氨末端激酶1/2/3抗体

马铃薯病MElisa试剂盒化肠道内富含的Kruppel样因子5抗原JMY  连接介导调节蛋白抗体

谷氨酰Elisa试剂盒脱氢酶抗原JMJD7  组蛋白去转移酶JMJD7抗体

尿苷二葡萄糖焦化酶Elisa试剂盒瘦素受体JMJD6  凋亡受体抗体

赤霉素合成酶Elisa试剂盒脂蛋白脂酶A2抗原JMJD5  组蛋白去化酶JMJD5抗体
细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。