产品名称:皮肤成纤维细胞;Hs865.Sk
形态特性:成纤维细胞样
生长特性:贴壁生长
特征特性:ATCC来源生长速度较慢
培养条件:DMEM(高糖)+10%FBS
传代方法:1:2传代
产品名称
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规格
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货号
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Hs865.Sk细胞
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T25
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FS-X3385
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度���计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
钠标准溶液 500mg/L,溶剂:水Anti-CCR-5/FITC 荧光素标记表面趋化因子受体5抗体IgG鸡α半糖抗原(Gal)酶联吸附测定试剂盒
钠标准溶液1.50mg/L,水质标样Anti-CCR6/CD196/FITC 荧光素标记趋化因子受体6抗体IgG鸡抗存活素抗体(Anti-Surv)酶联吸附测定试剂盒
乙烯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:二硫化碳Anti-CCR-7/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体7抗体IgG鸡D-二聚体(D2D)酶联吸附测定试剂盒
乙烯标准溶液 1000μg/mlAnti-CCR-8 /FITC 荧光素标记表面趋化因子受体8抗体IgG鸡麦考酚(MPA)酶联吸附测定试剂盒
水质银标样 分析标准品Anti-CCR-9/FITC 荧光素标记表面趋化因子受体9抗体IgG鸡阿黑皮素原(POMC)酶联吸附测定试剂盒
水质锶标样 浓度范围:2.00(mg/L),分析标准品Anti-CCR-10/FITC 荧光素标记表面趋化因子受体10抗体IgG鸡载脂蛋白D(ApoD)酶联吸附测定试剂盒
硒标准溶液 100mg/L,溶剂:水Anti-CCRK/FITC 荧光素标记周期相关激酶抗体IgG鸡白介素13(IL-13)酶联吸附测定试剂盒
硫根离子标准溶液500mg/L,溶剂:水Anti-CD2/FITC 荧光素标记CD2抗体IgG鸡核孔蛋白153kda(NUP153)酶联吸附测定试剂盒
硫根离子标准溶液5000mg/L,溶剂:水Anti-CD2AP/FITC 荧光素标记白分化抗原CD2AP抗体IgG鸡趋化素样因子超家族成员7(CKLFSF7)酶联吸附测定试剂盒
二氧化硫标准溶液 100mg/L,溶剂:吸收液Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 荧光素标记CD2F-10抗体IgG鸡皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)酶联吸附测定试剂盒
十二烷磺钠标准溶液 500mg/L,溶剂:水Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 荧光素标记CD2F-10抗体IgG鸡素β(LTβ)酶联吸附测定试剂盒
硫化物标准溶液 100mg/L,溶剂:水Anti-CD3/FITC 荧光素标记CD3蛋白抗体IgG鸡周期素依赖性激酶7(CDK7)酶联吸附测定试剂盒
硫化物标准溶液 硫离子:50~100µg/mLAnti-CD3/RBITC 红色荧光素罗丹明标记CD3抗体IgG鸡硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)酶联吸附测定试剂盒
度范围:0.038-0.997mg/L,分析标准品Anti-CD3/PE 荧光素PE标记CD3抗体IgG鸡喋呤(MTX)酶联吸附测定试剂盒
水质氨氮标样浓度范围:1.1mg/L,0.5mg/L,2.7mg/LAnti-CD4/FITC 荧光素标记CD4蛋白抗体IgG鸡葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)酶联吸附测定试剂盒
Hs865.Sk细胞脆裂病Elisa试剂盒肝脏型脂肪结合蛋白抗原Jagged1/CD339 Jagged1/CD339抗体
6-葡萄糖Elisa试剂盒肝脏型脂肪结合蛋白抗原Jagged 2 Notch配体Jagged 2蛋白抗体
6-果糖Elisa试剂盒层粘连蛋白(多肽抗原)Jab1 Jun激活区域-连接蛋白1抗体
环斑病Elisa试剂盒层粘连蛋白β1抗原Iumbrokinase 蚓激酶抗体
南方菜豆花叶病Elisa试剂盒核纤层蛋白A抗原ITPR3 5-三肌受体3抗体
南芥菜花叶病Elisa试剂盒凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体ITPR2 5-三肌受体2抗体
酪蛋白激酶3Elisa试剂盒人鼻咽癌癌因多肽抗原ITPR1 5-三肌受体1抗体
组蛋白H3.2Elisa试剂盒管内皮透明质受体抗原ITM2A 完整膜蛋白E25A抗体
tubby蛋白Elisa试剂盒血管紧张素转换酶(抗原)ITLN1 内皮凝集素HL1抗体
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