mSk-FBCs-12细胞

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产品名称：皮肤成纤维细胞；mSk-FBCs-12
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

钒标准溶液 500mg/L，溶剂：水Anti-CD31(PECAM-1)/PE  荧光素PE标记血小板内皮黏附分子-1抗体IgG鸡补体1q(C1q)酶联吸附测定试剂盒

中挥发性卤代烃混合标样 分析标准品Anti-CD31(PECAM-1)/HRP  辣根过氧化物酶标记血小板内皮黏附分子-1抗体IgG鸡补体因子1R(Clr)酶联吸附测定试剂盒

中挥发性卤代烃混合标样 分析标准品Anti-CD31/FITC  荧光素标记血小板内皮黏附分子-1抗体IgG鸡抗心脂抗体IgA(ACA-IgA)酶联吸附测定试剂盒

中挥发性有机物混合标样 分析标准品 Anti-CD33/Siglec-3/FITC  荧光素标记抗CD33抗体IgG鸡骨成型蛋白4 (BMP-4)酶联吸附测定试剂盒

水质总碱度标样 分析标准品Anti-CD33/FITC  荧光素标记抗CD33抗体IgG鸡谷氨脱氢酶(GDH/GLDH)酶联吸附测定试剂盒  

水质浊度标样 分析标准品Anti-CD33L/OBBP1/FITC  荧光素标记兔CD33L抗体IgG鸡二氧化酶(DAO)酶联吸附测定试剂盒

对二标准溶液 1000μg/ml，溶剂：二硫化碳Anti-CD34/FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠、兔、牛、猪、犬CD34抗体IgG鸡质金属蛋白酶25(MMP-25)酶联吸附测定试剂盒

对二标准溶液 1000μg/ml，溶剂： Anti-CD34(C-term) /FITC  荧光素标记CD34抗体（表面的唾液粘蛋白）C端蛋白多肽IgG鸡生长分化因子5(GDF5)酶联吸附测定试剂盒

对二标准溶液1mg/ml,溶剂:Anti-Anti-CD44v10 /FITC   荧光素标记兔抗人、大、小鼠CD44V10抗体IgG鸡垂体腺苷环化酶激活肽受体 (PACAPR)酶联吸附测定试剂盒

间二标准溶液1mg/ml,溶剂:,水质分析Anti-CD34/PE  荧光素PE标记CD34抗体（表面的唾液粘蛋白）IgG鸡鸟苷交换因子(GEF)酶联吸附测定试剂盒  

邻二 分析标准品Anti-CR1/CD35/FITC  荧光素标记Ⅰ型补体受体抗体（C3b/C4b受体抗体）IgG鸡孕酮和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)酶联吸附测定试剂盒

间二标准溶液 1000μg/ml，溶剂：二硫化碳Anti-CD36/FITC  荧光素标记CD36抗体IgG鸡核孔蛋白214kda(NUP214)酶联吸附测定试剂盒

间二标准溶液1000μg/ml，溶剂： Anti-CD38(human)/FITC  荧光素标记抗CD38抗体（人）IgG鸡XC趋化因子受体1(XCR1)酶联吸附测定试剂盒

间二标准溶液1 mg/ml,溶剂:Anti-CD38(mouse, rat)/FITC  荧光素标记抗CD38抗体（小鼠、大鼠）IgG鸡拮抗凋亡转录因子(AATF)酶联吸附测定试剂盒

邻二标准溶液 1000μg/ml，溶剂：二硫化碳Anti-CD40L /FITC  荧光素标记抗CD40L抗体IgG鸡多巴转运蛋白(DAT)酶联吸附测定试剂盒
mSk-FBCs-12细胞ω-3脂肪去饱和酶Elisa试剂盒黑皮质素-1受体抗原IRX4  Iroquois同源蛋白4抗体

单尿苷Elisa试剂盒髓样白血病-1抗原IRS-4  胰岛素受体底物-4抗体

三尿苷Elisa试剂盒多药耐药蛋白抗原IRS-3  胰岛素受体底物-3抗体

三鸟苷Elisa试剂盒肌增强因子2抗原IRS-2  胰岛素受体底物-2抗体

胞苷三Elisa试剂盒线粒体融合蛋白1IRS1  胰岛素受体底物-1抗体

木质化病Elisa试剂盒金属硫蛋白抗原IRS P53  胰岛素受体底物p53蛋白抗体

颗粒结合型淀粉合成酶Elisa试剂盒层粘连蛋白受体1抗体Iroquois homeobox protein 3  Irx3蛋白抗体

吡咯啉羧还原酶Elisa试剂盒层粘连蛋白受体1抗原（C端）IRGM  相关鸟苷三酶因抗体

辅酶IElisa试剂盒中期因子/肝素结合生长因子抗原IRF7  干扰素调节因子7抗体