产品名称:正常前列腺上皮细胞;RWPE-1
形态特性:上皮细胞
生长特性:贴壁生长
特征特性:肿瘤抑制基因:p53+[PubMed:9214605]pRB+[PubMed:9214605]一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人**瘤病毒的18(HPV-18)进行转化,建立了RWPE-1(ATCCCRL-11609)细胞株[PubMed:9214605].在三维Matrigel培养时,在雄作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed:11170142].当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE-1细胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并产生PSA。来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2细胞株(ATCCCRL-11610)[PubMed:9214605]和RWPE2-W99(ATCCCRL-2853)细胞株。另外,用N-甲醇-N-硝基脲(MNU)处理RWPE-1,建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。它们是WPECQ-ENA22(ATCCCRL-2849),WPECQ-ENB14(ATCCCRL-2850,WPECQ-ENB11(ATCCCRL-2851)和WPECQ-ENB26(ATCCCRL-2852)细胞株。据提供者报道,RWPE-1细胞株(ATCCCRL-11609)经过检测,乙肝、丙肝、人缺陷病毒都呈阴性。
培养条件:这株细胞的基本培养基作为Invitrogen(GIBCO)提供的kit的部分:角化细胞无血清培养基K-SFM,kit目录号17005-042。随kit提供这株细胞生长所需的两种添加剂(牛垂体提取物BPE及人重组表皮生长因子EGF)。配制完全生长培养基,需添加以下成分:0.05mg/mlBPE–随K-SFM提供5ng/mlEGF-随K-SFM提供。注意:不要过滤完全培养基。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37.0°C。或者KM专用培养基
传代方法:1:3传代,2-3天传一代。
产品名称
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RWPE-1细胞
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规格
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T25
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货号
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FS-X3397
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
公司优势:
1.具有多年的销售经验的行业背景,我司秉承质量优先的理念,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
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冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
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乙二二 分析标准品,≥99.7% (GC)Anti-CGP-39/YKL-40/FITC 荧光素标记软骨糖蛋白39抗体IgG鸡甘露糖受体C2 (MRC2)酶联吸附测定试剂盒
乙二二 for HPLC, 99.5%Anti-CGRP/FITC 荧光素标记降钙素因相关肽抗体IgG鸡骨成型蛋白7 (BMP-7)酶联吸附测定试剂盒
二乙二二 >99.0%(GC)Anti-ChAT/FITC 荧光素标记ChAT抗体IgG鸡视网膜母瘤抑制蛋白(PRB)酶联吸附测定试剂盒
二乙二二 standard for GC, ≥99.5% (GC)Anti-CHK1/FITC 荧光素标记抗周期检测点激酶1抗体IgG鸡白介素23 p40 (IL-23 p40)酶联吸附测定试剂盒
二乙二二 ≥99.5% (GC)Anti-CHK2/Cds1 /FITC 荧光素标记抗周期检测点激酶2抗体IgG鸡唾液结合球蛋白样凝集素3(SIGLEC3)酶联吸附测定试剂盒
二乙二二 无水级, 99.5%Anti-Phospho-CHK2 (Thr68)/FITC 荧光素标记化周期检测点激酶2抗体IgG鸡半凝集素8(GAL8)酶联吸附测定试剂盒
二乙二二 分析标准品,≥99.7% (GC)Anti-Chloramphenicol/FITC 荧光素标记抗霉素抗体IgG鸡强肽(Dyn)酶联吸附测定试剂盒
二乙二二 光谱级, ≥99%Anti-ChRM1 /FITC 荧光素标记蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗体IgG鸡金属硫蛋白1E (MT1E)酶联吸附测定试剂盒
聚乙二二 average Mn ~250Anti-ChRM2/FITC 荧光素标记蕈碱型乙酰胆碱受体M2抗体IgG鸡低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联吸附测定试剂盒
四乙二二 99%Anti-ChRM2/FITC 荧光素标记蕈碱型乙酰胆碱受体M2抗体 IgG鸡转移因子(TF)酶联吸附测定试剂盒
氧化 99.99% metals basisAnti-ChRM3/FITC 荧光素标记蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗体IgG鸡粘蛋白1(MUC1)酶联吸附测定试剂盒
氧化 99.999% metals basisanti-CIB1/FITC 荧光素标记钙-整合素结合蛋白1抗体IgG鸡结肠癌抗原(CCA)酶联吸附测定试剂盒
氧化 AR,98%,200目Anti-CIDE-B/FITC 荧光素标记促进凋亡因抗体IgG鸡组织蛋白酶C(CTSC)酶联吸附测定试剂盒
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