SK-BR-3细胞

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产品名称：乳腺腺癌细胞；SK-BR-3
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：这株细胞源自胸水。没有病毒颗粒。亚显微结构特征包括微丝和桥粒，肝糖原颗粒，大溶酶体，成束的细胞质纤丝。SK-BR-3细胞株过表达HER2/CS-erb-2基因产物。

培养条件：DMEM+10%FBS

传代方法：消化CQ-5分钟，1:2,3天内可长满
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

硝钆,六水 99.99% metals basisAnti-CKLFSF2(human)/FITC  荧光素标记人类新因子/趋化素样因子超家族成员2抗体IgG鸡脂酰丝氨(PS)酶联吸附测定试剂盒

硝镓(III) 水合物 99.9% metals basisAnti-CLCA4/FITC  荧光素标记钙激活离子通道4抗体IgG鸡低密度脂蛋白(LDL)酶联吸附测定试剂盒

硝镓(III) 水合物 99.99% metals basisAnti-CLDN1/FITC  荧光素标记紧密连接蛋白1抗体(C端)IgG鸡胸腺白血病抗原(TLA)酶联吸附测定试剂盒

硝镓(III) 水合物 99.999% metals basisAnti-CLDN1/FITC  荧光素标记紧密连接蛋白1抗体IgG鸡β-黑色素(βMSH)酶联吸附测定试剂盒

硝钆,六水 99.9% metals basisAnti-ocludin-5/FITC  荧光素标记紧密连接蛋白-5抗体IgG鸡状腺自身抗体(THAA)酶联吸附测定试剂盒

化铟 98%Anti-CLDN3/Claudin 3/FITC  荧光素标记紧密连接蛋白3抗体IgG鸡血浆硒蛋白P(SEPP1)酶联吸附测定试剂盒

化铟 99.99% metals basisAnti-CLDN4/Claudin 4/FITC  荧光素标记紧密连接蛋白4抗体IgG鸡骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1)酶联吸附测定试剂盒

化镧,七水 ARAnti-CLDN5/FITC  荧光素标记紧密连接蛋白5抗体IgG鸡肝癌抗原(PHC)酶联吸附测定试剂盒

硝镧 99.9% metals basisAnti-CLEC-1/CLEC1A/FITC  荧光素标记C型凝集素结构域家族1成员A抗体IgG鸡血管**素(ANG)酶联吸附测定试剂盒

化镧,无水 99.9% metals basis,颗粒Anti-CLEC-2/CLEC1B/FITC  荧光素标记C型凝集素结构域家族1成员B抗体IgG鸡神经粘附分子(NCAM/CD56)酶联吸附测定试剂盒

硝钕,六水 99.9% metals basisAnti-CLEC2D/OCIL/FITC  荧光素标记CLEC2D蛋白抗体IgG鸡半凝集素14(GAL14)酶联吸附测定试剂盒

化镨 99.99% metals basisAnti-CLEC5A/MDL1/FITC  荧光素标记C型凝集素结构域家族5成员A抗体IgG鸡谷转氨酶(ALT)酶联吸附测定试剂盒  

氧化铽 99.99% metals basisAnti-CLEC13D/MMR1/CD206/FITC  荧光素标记巨噬甘露糖受体抗体IgG鸡胶原酶I(Collagenase I)酶联吸附测定试剂盒  

硫铽(III),八水 99.9% metals basisAnti-Clostridium perfringens type D/FITC  荧光素标记兔抗D型产气荚膜梭抗体IgG鸡不对称二精氨(ADMA)酶联吸附测定试剂盒

硝镱 99.9% metals basisAnti-cofilin/FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠丝切蛋白抗体IgG鸡巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶联吸附测定试剂盒
SK-BR-3细胞苷油脱氢酶Elisa试剂盒脑肽IL-4I1  白介素4诱导蛋白1抗体

乙酰CoAElisa试剂盒肠道肽转运蛋白2/小肽转运蛋白2抗原IL-4 (human)  白介素4抗体(人)

Rubisco活化酶Elisa试剂盒蛋白激酶R样内质网激酶抗原IL-4  白介素4抗体

果糖-1,6-二酶Elisa试剂盒纤维束蛋白同源物1/肌动蛋白集束蛋白/圆线虫紫癜 抗原IL-3R alpha/CD123  白介素3受体a链抗体

甜菜碱脱氢酶Elisa试剂盒胃蛋白酶原C蛋白抗原IL-33/NFHEV  白介素33抗体

5-核糖激酶Elisa试剂盒过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗原IL-33  白介素33抗体

柠檬裂解酶Elisa试剂盒颗粒蛋白前体抗原IL-32/NK4  白介素32抗体

谷胱甘肽转移酶Elisa试剂盒抑制素/肿瘤抑制因子抗原IL-31RA/CRL3  白介素31受体a抗体

多Elisa试剂盒蛋白激酶A(多肽)IL-31  白介素31抗体