实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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T47D细胞
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T25
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FS-X3402
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产品名称：乳腺导管癌细胞；T47D
形态特性：上皮样
生长特性：贴壁生长
特征特性：T-47由IKeydar分离自一位54岁**侵入性导管癌的女性患者的胸腔积液；分化的上皮亚株(T-47D)有细胞质连接和17β雌二醇及其他类固醇、降钙素的受体；表达WNT7B癌基因。
培养条件：RPMI1640+10%FBS；0.2Units/ml牛胰岛素
传代方法：1：2传代
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
氟化锂 SP,光谱纯Anti-c-Myc tag/HRP 辣根过氧化物酶标记c-Myc tag标签抗体IgG鸡核孔蛋白188kda(NUP188)酶联吸附测定试剂盒
氟化锂 99.99% metals basisAnti-CNGA2/FITC 荧光素标记抗环核苷阳离子通道蛋白α2抗体IgG鸡趋化素样因子超家族成员4(CKLFSF4)酶联吸附测定试剂盒
氟化锂 CP,98.5%Anti-CNP/CNPase /FITC 荧光素标记C型钠尿肽抗体IgG鸡促血管**素2(ANG2)酶联吸附测定试剂盒
氟化锂 99.9% metals basisAnti-CNR-1/FITC 荧光素标记钙粘蛋白相关的神经受体1抗体IgG鸡C4结合蛋白β(C4BPβ)酶联吸附测定试剂盒
结晶化锂 AR,97.0%Anti-CNR-2/FITC 荧光素标记钙粘蛋白相关的神经受体2抗体IgG鸡水通道蛋白3(AQP-3)酶联吸附测定试剂盒
双(硅烷)氨锂 95%Anti-CNTF/FITC 荧光素标记睫状神经营养因子抗体IgG鸡XI型胶原α1(COL11α1)酶联吸附测定试剂盒
双(硅烷)氨锂 1.0 M in THFAnti-CNTFR Alpha/FITC 荧光素标记抗睫状神经营养因子受体α抗体IgG鸡纤维蛋白肽B(FPB)酶联吸附测定试剂盒
金属锂粒 99.9% metals basisAnti-Collagen I/FITC 荧光素标记抗I型胶原抗体IgG鸡α1连接素(CTNNα1)酶联吸附测定试剂盒
金属锂棒 99.9% metals basis，棒Anti-Collagen II /FITC 荧光素标记抗Ⅱ型胶原抗体IgG鸡钙调结合蛋白(CALD)酶联吸附测定试剂盒
水质锂标样 分析标准品Anti-Collagen III /FITC 荧光素标记抗Ⅲ型胶原抗体IgG鸡胎儿血红蛋白(HBF)酶联吸附测定试剂盒
锂 低钠级，99.95% metals basisAnti-Collagen III /FITC 荧光素标记抗Ⅲ型胶原抗体(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)IgG鸡III型前胶原(PCIII)酶联吸附测定试剂盒
金属锂 电池级，99.9% metals basisAnti-Collagen IV /FITC 荧光素标记抗IV型胶原抗体IgG鸡糖缺失性转铁蛋白(CDT)酶联吸附测定试剂盒
锂 高钠级，98.5%Anti-Collagen V /FITC 荧光素标记抗Ⅴ型胶原抗体IgG鸡叉头框蛋白O4(FOXO4)酶联吸附测定试剂盒
氧化锂 99.99% metals basisAnti-Collagen VI /FITC 荧光素标记抗Ⅵ型胶原抗体IgG鸡VI型胶原α3(COL6α3)酶联吸附测定试剂盒
氢化锂 97%Anti-Collagen VII /FITC 荧光素标记抗Ⅶ胶原抗体(Ⅶ型胶原)抗体IgG鸡16α羟雌酮1(16-α OHE-1)酶联吸附测定试剂盒
T47D细胞黄素单加氧酶Elisa试剂盒新型金属质蛋白酶(抗原)IL-23 白介素-23抗体
金黄色葡萄球Elisa试剂盒脂联素受体-1(抗原)IL-22R 白介素-22受体抗体
杆状病Elisa试剂盒脂联素受体-2(抗原)IL-22BP/IL22RA2 白介素22受体结合蛋白抗体
萜类合酶Elisa试剂盒前列腺性酶抗原IL-22 白介素-22抗体
糖转移酶Elisa试剂盒前列腺性酶抗原(人)IL-21R 白介素21受体抗体
核糖体蛋白60SElisa试剂盒P选择素抗原IL-21 白介素21抗体
脂肪去饱和酶3Elisa试剂盒溶酶体膜糖蛋白抗原IL-20RB/IL-20R2 白介素20受体β链抗体
硬脂酰-ACP去饱和酶Elisa试剂盒一种肿瘤抑制因抗原（C端）IL-20R alpha/IL20RA 白介素20受体α链抗体
胱氨Elisa试剂盒微白蛋白/细小清蛋白抗原IL-20 白介素-20抗体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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