MCF/Adr细胞

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产品名称：乳腺癌阿霉素耐药细胞株
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

培养条件：RPMI-1640

传代方法：1：2传代
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

呋喃唑酮 分析标准品Anti-DAT1/FITC  荧光素标记抗多巴相关转录因子1抗体IgG鸡凝血因子XI(F11)酶联吸附测定试剂盒  

呋喃唑酮 98%Anti-DBH /FITC  荧光素标记多巴β羟化酶抗体IgG鸡质金属蛋白酶2(MMP-2)酶联吸附测定试剂盒

呋喃西林 分析标准品Anti-DCC/FITC  荧光素标记兔抗结直肠癌缺失因抗体IgG鸡纤维蛋白原(FBG)酶联吸附测定试剂盒

呋喃西林 98%Anti-DC-LAMP/LAMP-3/CD208/FITC  荧光素标记CD208抗体IgG鸡3-羟-3-戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)酶联吸附测定试剂盒

硫铝，十八水 Ph. Eur., BP, 100-110%, 51.0-59.0% Al2(SO4)3 Anti-DC-SIGN/CD209/CLEC4L/FITC  荧光素标记CD209抗体IgG鸡胱天蛋白酶7(CASP7)酶联吸附测定试剂盒

硫铝 99.99% metals basisAnti-DC-SIGNR/CD299/FITC  荧光素标记CD299抗体IgG鸡蛋白17(Sp17)酶联吸附测定试剂盒

赫斯特荧光燃料，33258 98%Anti-DCIR/CLEC4A/FITC  荧光素标记C型凝集素结构域家族4成员A抗体IgG鸡补体因子B(CFB)酶联吸附测定试剂盒

赫斯特荧光燃料，33342 98%Anti-DCN/FITC  荧光素标记抗核心蛋白聚糖抗体IgG鸡脱氢酶A(LDHA)酶联吸附测定试剂盒  

胞内钙荧光探针BAPTA, AM  95%Anti-DCP/FITC  荧光素标记异常凝血酶原/脱-γ-羧凝血酶原抗体IgG鸡α-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)酶联吸附测定试剂盒  

2',7'-二-(2-羧乙)-5(6)-羧荧光素 90%Anti-DCP /HRP  辣根过氧化物酶标记异常凝血酶原/脱-γ-羧凝血酶原抗体IgG鸡死亡相关蛋白6(DAP6)酶联吸附测定试剂盒

2',7'-二-(2-羧乙)-5(6)-羧荧光素乙酰酯1 mg/ml,溶剂:DMSOAnti-DCX/FITC  荧光素标记双皮质素抗体IgG鸡硫皮肤素差向异构酶(DSE)酶联吸附测定试剂盒  

2',7'-二-(2-羧乙)-5(6)-羧荧光素乙酰酯Mixed isomersAnti-Phospho-Doublecortin (Ser297) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠等化双皮质素抗体IgG鸡胸腺肽β10(TMSβ10)酶联吸附测定试剂盒

6-羧荧光素 95%Anti-D-DIMER/FITC  荧光素标记交联纤维蛋白二聚体抗体IgG鸡多巴色素异构酶(DT)酶联吸附测定试剂盒

5-羧荧光素 95%Anti-DDAH-II /FITC   荧光素标记双精氨水解酶2抗体IgG鸡性别决定区Y框蛋白1(SOX1)酶联吸附测定试剂盒

5-羧四罗丹明 95%Anti-DDB1/FITC  荧光素标记损伤DNA结合蛋白1抗体IgG鸡中期因子(MK)酶联吸附测定试剂盒
MCF/Adr细胞羧酯酶Elisa试剂盒上皮生长因子样域酪氨激酶2抗原IGFBP1  胰岛素样生长因子结合蛋白1抗体

乙酰胆碱酯酶Elisa试剂盒视黄受体应答蛋白2抗原IGFALS/ALS  胰岛素样生长因子不稳定亚ALS抗体

神经酰合酶Elisa试剂盒Toll样受体3抗原IGF2R/M6PR/CD222/Mannose 6 Phosphate Receptor  胰岛素样生长因子2受体抗体

鞘氨激酶Elisa试剂盒Toll样受体4抗原IGF2BP3/IMP3  胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3抗体

β-羟丁Elisa试剂盒Toll样受体5抗原IGF2BP2/IMP2  胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2抗体

几丁质酶8受体激酶Elisa试剂盒血栓调节蛋白多肽IGF2BP1/IMP1  胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白1抗体

麦豆球蛋白Elisa试剂盒腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原IGF1R/CD221  胰岛素样生长因子I受体抗体

高分子量清蛋白Elisa试剂盒肿瘤坏死因子-α抗原IGF1R/CD221  胰岛素样生长因子1受体抗体

麦溶蛋白Elisa试剂盒肿瘤坏死因子-β抗原IGF II/IGF2  胰岛素样生长因子-II抗体