HEK-293细胞

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产品名称：胚肾细胞；HEK-293
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1～4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物**级别为2级。

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法：1：2传代
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

右旋龙脑 98%Anti-DcR1/TRAIL-R3/TRID/LIT   荧光素标记DcR1抗体IgG鸡纤维蛋白原γ(FGγ)酶联吸附测定试剂盒

右旋龙脑  分析标准品，用于萜烯分析Anti-HBME-1 /FITC  荧光素标记间质HBME1蛋白抗体IgG鸡43KDa Tar DNA结合蛋白(TDP43)酶联吸附测定试剂盒

松香 75%Anti-DcR2/CD264 /FITC  荧光素标记抗诱捕受体2抗体IgG鸡卵泡受体(FSHR)酶联吸附测定试剂盒

β-蒎烯 98%Anti-DcR3/FITC  荧光素标记抗诱捕受体3抗体IgG鸡烟酰腺嘌呤二核苷氧化酶1(NOX1)酶联吸附测定试剂盒

α-蒎烯 98%Anti-HBV/pre S1/S2 protein /FITC   荧光素标记抗乙肝病pre S1/乙肝病pre S2抗体IgG鸡Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)酶联吸附测定试剂盒

松节油 ARAnti-HCCR-1/FITC  荧光素标记人因/bri3结合蛋白抗体IgG鸡丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶联吸附测定试剂盒

碳镉 AR,98%Anti- Alpha-HCG/FITC  荧光素标记α亚人绒毛膜促性腺抗体IgG鸡嗜性白血球相关之RNA水解酵素家族成员12(EAR12)酶联吸附测定试剂盒

醌 GRAnti- Beta-HCG /FITC  荧光素标记抗人beta亚人绒毛膜促性腺抗体 IgG鸡不均一核糖核蛋白U (HNRPU)酶联吸附测定试剂盒

醌 98%Anti-HCFHrp/BTA/FITC  荧光素标记抗膀胱肿瘤抗原IgG鸡催产素受体(OTR)酶联吸附测定试剂盒

环戊乙 98%Anti-Hck/FITC  荧光素标记造血激酶抗体IgG鸡抗载脂蛋白A1抗体(Apo A1-Ab)酶联吸附测定试剂盒  

1-溴-2-萘酚 98%Anti-HCMV PP65/HHV5 PP65/FITC  荧光素标记人巨病PP65/CMV低质脂蛋白抗体IgG鸡肾上腺素能α1A受体(ADRA1A)酶联吸附测定试剂盒

环戊乙 98%Anti-HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC  荧光素标记人巨病UL23抗体IgG鸡载脂蛋白A2(ApoA2)酶联吸附测定试剂盒

环戊乙 97%Anti-HCMV UL49/FITC  荧光素标记人巨病UL49抗体IgG鸡过氧化还原酶5(PRDX5)酶联吸附测定试剂盒

内消旋-2,3-二巯丁二 98%Anti-HCN4/FITC  荧光素标记环化核苷调控阳离子通道蛋白亚型4IgG鸡β1连接素(CTNNβ1)酶联吸附测定试剂盒

硫代苹果 98%Anti-HCV-Core/FITC  荧光素标记型肝炎病-C区抗体IgG鸡肟前列腺素D2(PGD2-MOX)酶联吸附测定试剂盒
HEK-293细胞色素P4501A1Elisa试剂盒核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原)Histone H3 (Di Methyl K4)  二化组蛋白H3K4抗体

焦酶Elisa试剂盒干燥症SSB/La蛋白Histone H3 (Di Methyl K36)  二化组蛋白H3抗体

赤霉素3-氧化酶Elisa试剂盒Smad 2(抗原)Histone H3 (Di Methyl K27)  化组蛋白H3抗体

脂酶A1Elisa试剂盒相关抗原5(多肽抗原)Histone H3  组蛋白H3抗体

蔗糖合成酶Elisa试剂盒肺表面活性蛋白A(抗原)Histone H2B  组蛋白H2B抗体

苹果褪绿叶斑病Elisa试剂盒滑膜凋亡抑制物1（抗体）Histone H2A.Z/ H2AFZ  组蛋白H2AZ抗体

苹果茎痘病Elisa试剂盒非受体型酪氨激酶(抗原)Histone H2A.x  组蛋白H2AX抗体

谷氨酰合成酶Elisa试剂盒微管相关蛋白（抗原）Histone H2A  组蛋白H2A抗体

百香果斑驳病Elisa试剂盒CD90Histone H1  组蛋白H1抗体