HA细胞

实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

产品名称：羊膜细胞；HA
生长特性：贴壁生长

培养条件：RPMI1640+10%FBS

传代方法：消化CQ-5分钟，1:2,3天内可长满

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
硝镧 99.9% metals basisAnti-IAA/FITC  荧光素标记吲哚-3-乙抗体/植物生长素单克隆抗体IgG鸡心脏肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)酶联吸附测定试剂盒

硫镱,八水 99.9% REOAnti-IASPP/FITC  荧光素标IASPP蛋白抗体IgG鸡β肌动蛋白(β-actin)酶联吸附测定试剂盒

3-酰烯乙酯 94%Anti-Iba-1/FITC  荧光素标记离子钙接头蛋白抗体IgG鸡癌胚抗原(CEA)酶联吸附测定试剂盒

2，3-二巯磺钠盐 95%Anti-ICAD/FITC  荧光素标记Caspase 激活的脱氧核糖核酶抑制剂抗体IgG鸡色素P450家族成员1A1(CYP1A1)酶联吸附测定试剂盒

二氧乙酯 97%Anti-ICAM-1(CD54)/FITC  荧光素标记间粘附分子-1抗体IgG鸡组织型纤溶酶原激活因子(tPA)酶联吸附测定试剂盒

溴代炔 99%Anti-CD54/ICAM-1/Biotin  生物素标记间粘附分子-1抗体IgG鸡纤维胶凝蛋白1(FCN1)酶联吸附测定试剂盒

金属锂粒 99.9% metals basisAnti-ICAM-3/CD50/FITC  荧光素标记间粘附分子-3抗体IgG鸡白介素15(IL-15)酶联吸附测定试剂盒

碳化钨 粉末，99.9% metals basis, <10μmAnti-Icos/CD278/FITC  荧光素标记诱导协同激分子CD278抗体IgG鸡瘦素受体(LEPR)酶联吸附测定试剂盒

碳化钨 粉末，99.9% metals basis, ≤1μmAnti-ICOS-L/B7-H2/CD275/FITC  荧光素标记诱导协同激分子配体CD275抗体IgG鸡素相关蛋白A(CAPA)酶联吸附测定试剂盒  

钴 99.99%Anti-IDE/FITC  荧光素标记胰岛素降解酶抗体IgG鸡肌肉糖原化酶(PYGM)酶联吸附测定试剂盒

硫钴，七水 AR，99.5%Anti-ID1/Inhibitor of DNA binding 1 /FITC  荧光素标记DNA结合抑制因子1抗体IgG鸡异体移植炎性因子1(AIF1)酶联吸附测定试剂盒

硫钴，七水 99.99% metals basisAnti-IDE/FITC  荧光素标记胰岛素降解酶抗体IgG鸡生长分化因子10(GDF10)酶联吸附测定试剂盒

化钴 99.998% metals basisAnti-IFABP/FITC  荧光素标记小肠型脂肪结合蛋白抗体IgG鸡Pdgfa相关蛋白(PDAP1)酶联吸附测定试剂盒

硫镍，七水 99.99% metals basisAnti-IFABP/FITC  荧光素标记小肠型脂肪结合蛋白抗体IgG鸡Salusin α蛋白(Salusin α)酶联吸附测定试剂盒

镍粉 99.99% metals basis，200目Anti-IFI16/p16 /FITC  荧光素标记γ干扰素诱导蛋白16抗体IgG鸡腺苷三结合盒转运体G2(ABCG2)酶联吸附测定试剂盒
HA细胞甘油-3-酰转移酶Elisa试剂盒CD3 epsilon(抗原)Hemopexin/HPX  糖蛋白β-1B抗体

尿苷二葡萄糖脱氢酶Elisa试剂盒霉素偶联牛血清白蛋白Hemoglobin α  糖化血红蛋白α抗体

γ-谷氨酰转肽酶Elisa试剂盒霉素偶联鸡卵白蛋白蛋白Hemoglobin Beta  血红蛋白β抗体

谷胱甘肽合成酶Elisa试剂盒干扰素诱导T趋化因子抗原Heme Oxygenase 1/HO-1  血红素氧合酶 1/热休克蛋白32抗体

谷氨酰化转移酶Elisa试剂盒组织蛋白酶Ghemagglutinin protein/H  麻疹病血凝素抗体

异戊烯转移酶Elisa试剂盒CD68（多肽抗原）HEF1  蛋白激酶底物相关蛋白抗体

GA20-氧化酶Elisa试剂盒胆碱乙酰转移酶（抗原）HECA  HECA蛋白抗体

氨酰tRNA合成酶Elisa试剂盒高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗原HEC1  癌高表达蛋白Hec1抗体

转肽酶Elisa试剂盒柯萨奇病A16型聚蛋白3DHEBP2  Heme结合蛋白2抗体
细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。