293FT细胞

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产品名称：表达SV40T抗原胚肾上皮细胞；293FT
形态特性：圆形

生长特性：贴壁生长

特征特性：该细胞稳定表达SV40大T抗原，并且促进适病毒产物的产生。

培养条件：DMEM(HG)+500ug/mlG418+10%FBS

传代方法：1：2传代
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

5-氧-3-吡啶 97%Anti-phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶gamma抑制剂抗体IgG鸡cAMP反应元件结合蛋白(CREB)酶联吸附测定试剂盒

三氧化钨 99.99% metals basisAnti-phospho-IKK alpha (Thr23) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG鸡多巴受体D2(D2R/DRD2)酶联吸附测定试剂盒

三氧化钨 99.8% metals basisAnti-phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC  荧光素标记化核因子κB激酶gamma抑制剂抗体IgG鸡血管紧张素II受体1抗体(ANGⅡR1-Ab)酶联吸附测定试剂盒  

氟化铝 99.9% metals basisAnti-phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG鸡载脂蛋白C1(ApoC1)酶联吸附测定试剂盒

氟铝铵  98%Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG鸡肺癌标志物DR-70(DR-70TM)酶联吸附测定试剂盒

乙钴，四水 99.9% metals basisAnti-Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶alpha/beta抑制剂抗体IgG鸡黑素瘤缺乏因子2(AIM2)酶联吸附测定试剂盒

硫钴，七水 AR，99.5%Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶alpha/beta抑制剂抗体IgG鸡脑素受体(CNR1)酶联吸附测定试剂盒

硫钴，七水 99.99% metals basisAnti-phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG鸡酮脱氢酶酶(PDP)酶联吸附测定试剂盒

碱式碳镍 ARAnti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG鸡III型前胶原氨端原肽(PIIINP)酶联吸附测定试剂盒

邻二酰亚 99%Anti-phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC  荧光素标记化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG鸡淀粉样前体蛋白(APP)酶联吸附测定试剂盒

1,3,5- CP,97%Anti-IL-4/FITC   荧光素标记白介素4抗体IgG鸡凝血酶原片段F1+2(F1+2)酶联吸附测定试剂盒

1,2,4- 98%Anti-IL-4/FITC  荧光素标记抗白介素4抗体(人)IgG鸡载脂蛋白H(ApoH)酶联吸附测定试剂盒  

氢氧化 电子级, 99.99% metals basis，钠除外Anti-IL-4R/FITC  荧光素标记白介素4受体抗体IgG鸡C-Myc结合蛋白(MYCBP)酶联吸附测定试剂盒

氢氧化 电子级，99.999% metals basis，钠除外Anti-IL-5/FITC   荧光素标记白介素5抗体IgG鸡神经调节蛋白4(NRG-4)酶联吸附测定试剂盒

氢氧化钠 Ph. Eur., BP, NF, E524, 98-100.5%, pelletsAnti-IL-5R Alpha/CD125/FITC  荧光素标记白介素-5受体α链抗体IgG鸡血小板相关补体3(PAC3)酶联吸附测定试剂盒
293FT细胞甘薯潜隐病Elisa试剂盒脂肪合成酶HDAC3/HD3  组蛋白去乙酰化酶3抗体

反玉米素Elisa试剂盒丝聚蛋白/中间丝蛋白抗原HDAC2/HD2  组蛋白去乙酰化酶2抗体

反式玉米素核苷Elisa试剂盒脂肪去饱和酶1HDAC12  组蛋白去乙酰化酶12抗体

磺转移酶Elisa试剂盒γ1氨丁偶联血蓝蛋白HDAC11  组蛋白去乙酰化酶11抗体

N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶Elisa试剂盒γ1氨丁偶联牛血清白蛋白HDAC10  组蛋白去乙酰化酶10抗体

8-羟鸟嘌呤DNA糖苷酶Elisa试剂盒糖原合酶激酶-3 beta（多肽）HDAC1/HD1  组蛋白去乙酰化酶1抗体

L-异天冬氨-转移酶ⅠElisa试剂盒荧光素标记庆大霉素HCV-NS4a  型肝炎病-NS4a抗体

核糖体蛋白Elisa试剂盒糖原合酶激酶-3α （多肽）HCV-NS3  型肝炎病-NS3抗体

锰超氧化物歧化酶Elisa试剂盒化糖原合酶激酶-3β （多肽）HCV-NS1  型肝炎病-NS1抗体