实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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HE-MEF细胞
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T25
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FS-X3450
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产品名称：HE-MEF
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
氧化铝 99.998% metals basis ,5～6μm,粉末Anti-IL-12R Beta1/CD212/FITC 荧光素标记白介素-12受体β1抗体IgG鸡鸟氨氨酰转移酶(OCT)酶联吸附测定试剂盒
氧化铝 99．99%，镀膜Anti-IL-12R Beta2/FITC 荧光素标记白介素-12受体β2抗体IgG鸡间隙连接蛋白26(CX26)酶联吸附测定试剂盒
氧化铝G TLCAnti-IL-13/FITC 荧光素标记白介素13抗体IgG鸡金属硫蛋白2 (MT2)酶联吸附测定试剂盒
三氧化二锑 SPAnti-IL-13Ra1/FITC 荧光素标记白介素-13受体a1抗体IgG鸡神经激肽A(NKA)酶联吸附测定试剂盒
三氧化二锑 99.99% metals basisAnti-IL-13Ra2/FITC 荧光素标记白介素-13受体a2抗体IgG鸡粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)酶联吸附测定试剂盒
三氧化二锑 AR，99.5%Anti-IL-14/Taxilin alpha/FITC 荧光素标记抗白介素14抗体IgG鸡二酯酶4D(PDE4D)酶联吸附测定试剂盒
三氧化二锑 99.9%，平均粒径：0.7 µmAnti-IL-15/FITC 荧光素标记白介素15抗体IgG鸡5核苷酶(5-NT)酶联吸附测定试剂盒
三氧化二锑 99.999% metals basisAnti-IL-15R Alpha/FITC 荧光素标记白介素15受体α抗体IgG鸡γ1肌动蛋白(ACTG1)酶联吸附测定试剂盒
三氧化二锑 CP，99%Anti-IL-16/FITC 荧光素标记白介素-16抗体IgG鸡分裂周期蛋白23(CDC23)酶联吸附测定试剂盒
活性氧化铝 40-60目 GCAnti-IL-16/FITC 荧光素标记白介素16抗体IgG鸡谷胱甘肽S转移酶κ1(GSTκ1)酶联吸附测定试剂盒
活性氧化铝 60-80目 GCAnti-IL-17/FITC 荧光素FITC标记白介素-17抗体IgG鸡血管紧张素II受体1(ANG II R1)酶联吸附测定试剂盒
活性氧化铝 80-100目 GCAnti-IL-17B/FITC 荧光素标记白介素-17B抗体IgG鸡染色质区解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)酶联吸附测定试剂盒
氟化铝 99.9% metals basisAnti-IL-17/PE 荧光素PE标记白介素-17抗体IgG鸡脂多糖结合蛋白(LBP)酶联吸附测定试剂盒
氟化铝 99.99% metals basisAnti-IL-17R/IL-17RA/CD217/FITC 荧光素标记白介素17受体抗体IgG鸡唾液结合球蛋白样凝集素8(SIGLEC8)酶联吸附测定试剂盒
铝片 0.1mm,99.99% metals basisAnti-IL-17(Interleukin-17)human/FITC 荧光素标记白介素-17抗体（人）IgG鸡肝生长因子(HGF)酶联吸附测定试剂盒
HE-MEF细胞烟碱去化酶Elisa试剂盒人血清白蛋白Hck 造血激酶抗体
性酯酶Elisa试剂盒人beta 亚人绒毛膜促性腺抗原HCG/LH/FSH/TSH alpha 人绒毛膜促性腺α亚抗体(Cg A)
维生素B3Elisa试剂盒高迁移率族蛋白-1(抗原)HCG Beta(4H7) 人绒毛膜促性腺β亚单抗
维生素B5Elisa试剂盒水蛭素HCG alpha(4A8) 人绒毛膜促性腺α 亚单抗
维生素B7Elisa试剂盒人类状瘤病16抗原HCF2/Heparin Cofactor II 肝素辅助因子II抗体
维生素B9Elisa试剂盒铁调节蛋白25HCF-1 宿主因子1抗体
木葡聚糖水解酶Elisa试剂盒4羟壬烯偶联牛血清白蛋白HCCR2/LETMD1 原癌因2抗体
对氧酶Elisa试剂盒干扰素-γ多肽抗原（人）HCCR1/BRI3BP 原因1/bri3结合蛋白抗体
对氧酶1Elisa试剂盒白介素-17抗原（人）HBZ/Hemoglobin ζ 血红蛋白ζ链抗体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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