产品名称：胃癌细胞；MKN-74
形态特性：上皮细胞样
生长特性：贴壁生长
培养条件：RPMI1640+10%FBS
传代方法：1：2传代
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产品名称
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规格
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货号
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MKN-74细胞
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T25
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FS-X3458
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
金属镝 99.9% (REO)Anti-KLF9/FITC 荧光素标记转录因子KLF9抗体IgG鸡酯酰肌特异性脂酶Cβ1(PLCβ1/PI-PLC)酶联吸附测定试剂盒
氟化镝 99.99% metals basisAnti-KLF13/RFLAT-1 /FITC 荧光素标记肠道内富含的Kruppel样因子13抗体IgG鸡周期素依赖性激酶1(CDK1)酶联吸附测定试剂盒
溴化镝(III) 无水, 粉末, 99.99% metals basisAnti-KLK1/FITC 荧光素标记激肽释放酶1抗体IgG鸡载脂蛋白C4(ApoC4)酶联吸附测定试剂盒
化镝(III) 无水, 鳞片, 99.99% metals basisAnti-KLK3/FITC 荧光素标记激肽释放酶3/舒血管素3抗体IgG鸡卵泡抑素(FST)酶联吸附测定试剂盒
硫镝(III),八水 99.9%Anti-KLK4/FITC 荧光素标记激肽释放酶4抗体IgG鸡促状腺素(TSH)酶联吸附测定试剂盒
硫镝(III) 99.99% metals basisAnti-KLK7/FITC 荧光素标记激肽释放酶7抗体IgG鸡白抗原A(HLA-A)酶联吸附测定试剂盒
氧化铒 99.99%Anti-KLK9/FITC 荧光素标记激肽释放酶9抗体IgG鸡EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体(EJ/GlyRS)酶联吸附测定试剂盒
氧化铒 99.9% metals basisAnti-KLK10/FITC 荧光素标记激肽释放酶10抗体IgG鸡肝配蛋白A受体10 (EPHA10)酶联吸附测定试剂盒
氟化铒 99.99% metals basisAnti-KLK14/FITC 荧光素标记激肽释放酶14抗体IgG鸡蛋白激酶C-δ1(PKCδ1)酶联吸附测定试剂盒
金属铒 99.9% metals basis,粉末,50目Anti-KLRF1/NKp80/FITC 荧光素标记性受体NK-p80抗体IgG鸡ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1元4(ADAMTS4)酶联吸附测定试剂盒
氟化铒 99.9% metals basisAnti-K-ras/FITC 荧光素标记原癌因K-ras抗体IgG鸡早期生长应答蛋白3(EGR3)酶联吸附测定试剂盒
化铒(III),六水 99.5% metals basisAnti-KT3 tag/FITC 荧光素标记KT3 tag标签抗体IgG鸡乙酰胆碱酯酶关联蛋白(ACHAP)酶联吸附测定试剂盒
化铒(III) 六水合物 99.995% metals basisAnti-KT3 tag/HRP 辣根过氧化物酶标记KT3 tag标签抗体IgG鸡乙酰胆碱酯酶(AChE)酶联吸附测定试剂盒
溴化铒(III) 超干, 99.99% REOAnti-KCNA5/FITC 荧光素标记通道混合相关蛋白亚型5抗体IgG鸡信号传导转录激活因子1(STAT1)酶联吸附测定试剂盒
化铒(III) 无水, 粉末, 99.99%Anti-Ku-70/FITC 荧光素标记DNA修复酶Ku70抗体IgG鸡Apelin蛋白(APLN)酶联吸附测定试剂盒
MKN-74细胞β-半甘露聚糖酶Elisa试剂盒促状腺素释放GTPBP10/Claudin12 紧密连接蛋白12抗体
β-半糖甘露聚糖Elisa试剂盒胸腺五肽GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 三鸟苷环水解酶抗体
NAD激酶Elisa试剂盒状腺素T4偶联牛血清白蛋白GTF2H1 通用转录因子2H肽1抗体
NAD激酶Elisa试剂盒重组人肿瘤坏死因子GTF2B 通用转录因子GTF2B抗体
末端脱氧核苷转移酶Elisa试剂盒端粒酶逆转录酶GTDC1 糖转移酶样1抗体
甘薯病2Elisa试剂盒抗肽GstP1/GST class-pi 谷胱甘肽硫转移酶pi因抗体
甘薯病CElisa试剂盒拓普西异构酶Ⅰ抗原GSTO1 谷胱甘肽硫转移酶ω1抗体
D-果糖Elisa试剂盒转铁蛋白GSTCD 谷胱甘肽硫转移酶C段结构域抗体
抗肽Elisa试剂盒色氨羟化酶(多肽)GSTA3 谷胱甘肽S转移酶A3抗体
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