产品名称:脐静脉血管内皮细胞;HUVEC
生长特性:贴壁生长
培养条件:ECM专用培养基
传代方法:1:2传代
产品名称
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规格
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货号
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HUVEC细胞
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T25
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FS-X3470
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
硝钐(III) 六水合物 99.9% metals basisAnti-MEK6/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶MKK6抗体IgG鸡血管内皮生长因子165 (VEGF165)酶联吸附测定试剂盒
硝钐 99.999% metals basisAnti-MKK3/FITC 荧光素标记抗丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗体IgG鸡c-fos 酶联吸附测定试剂盒
化银 99%Anti-Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗体IgG鸡甘露聚糖结合凝集素相关丝氨蛋白酶2(MASP2)酶联吸附测定试剂盒
氧化钪(Ⅲ) 99.99% (REO) Anti-Phospho-MEK6 (Ser207)/FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激酶MKK6抗体IgG鸡凝血因子Ⅱ(F2)酶联吸附测定试剂盒
氧化钪(Ⅲ) 99.999% (REO)Anti-Phospho-MEK6 (Ser202)/FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激酶MKK6抗体IgG鸡半胱天冬酶3(CASP3)酶联吸附测定试剂盒
溴化银 99.9%Anti-Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) /FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体IgG鸡胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)酶联吸附测定试剂盒
溴化银 98%Anti-MKP-1/DUSP1/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶酶-1抗体IgG鸡白调节素(LR)酶联吸附测定试剂盒
草锶 5N,99.999%Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激酶酶-1抗体IgG鸡抗钙调素特异抗体(CAM-Ab)酶联吸附测定试剂盒
化镝(III) 99.9%,无水级,充氩封装Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激酶酶-1抗体IgG鸡睾酮受体(TR)酶联吸附测定试剂盒
二氧化硅 ARAnti-MKP-2/DUSP4/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶酶-2抗体IgG鸡前动力蛋白受体1(PKR1)酶联吸附测定试剂盒
氧化银 99.99% metals basisAnti-MLK3 /FITC 荧光素标记丝氨/苏氨蛋白激酶MLK3抗体IgG鸡脂氧素A4(LXA4)酶联吸附测定试剂盒
二氧化硅 99.99%,1-3mmAnti-Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)/FITC 荧光素标记化丝氨/苏氨蛋白激酶MLK3抗体IgG鸡脂肪分化相关蛋白(ADRP)酶联吸附测定试剂盒
化银 99.99%Anti-MLCK/FITC 荧光素标记肌球蛋白轻链激酶抗体IgG鸡谷氨脱羧酶1(GAD1)酶联吸附测定试剂盒
钛锶 99.5% trace metals basis,纳米, <100 nmAnti-Myosin Phosphatase/FITC 荧光素标记肌球蛋白酶抗体IgG鸡前白蛋白(PA)酶联吸附测定试剂盒
钛锶 99.5% metals basis,粉末, 5 μmAnti-Phospho-MYPT1 (Ser507)/FITC 荧光素标记化肌球蛋白酶抗体IgG鸡真核翻译起始因子3a(eIF3a)酶联吸附测定试剂盒
HUVEC细胞脉斑驳病Elisa试剂盒兔抗人Kappa链抗血清(k-链抗血清)Goat anti-rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清
褪绿病Elisa试剂盒兔抗人IgG(γ-链)恒定区抗血清Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG
轻斑驳病Elisa试剂盒牛血清白蛋白抗血清Goat Anti-rabbit IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗兔IgG
叶脉斑驳病Elisa试剂盒荧光素Cy7标记兔IgG(流式同型对照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗兔IgG
酪蛋白激酶Elisa试剂盒荧光素Cy7标记小鼠IgG(流式同型对照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗兔IgG
羟赖氨吡啶啉Elisa试剂盒荧光素Cy7标记羊IgG(流式同型对照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗兔IgG
赖氨吡啶啉Elisa试剂盒荧光素Cy7标记大鼠IgG(流式同型对照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗兔IgG
玉米黄质Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记兔IgG(流式同型对照)Goat Anti-rabbit IgG/PE PE标记的羊抗兔IgG
β-隐黄质Elisa试剂盒荧光素PE标记兔抗FITCGoat Anti-rabbit IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG
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