实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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PL45细胞
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T25
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FS-X3474
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产品名称：胰腺导管腺癌细胞；PL45
形态特性：上皮样
生长特性：贴壁生长
培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS
传代方法：1：2传代
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
化铥(III),六水 99.99% metals basisAnti-MRP5/ABCC5/FITC 荧光素标记多药耐药相关蛋白5抗体IgG鸡神经生长因子 (NGF)酶联吸附测定试剂盒
氟化铥(III),无水 粉末, 99.99%Anti-MrpL28 /FITC 荧光素标记线粒体核糖体蛋白L28抗体IgG鸡平足蛋白(PDPN)酶联吸附测定试剂盒
化铥(III) 无水 粉末,99.9% metals basisAnti- Alpha-MSH/POMC /FITC 荧光素标记α黑素/阿黑皮素原抗体IgG鸡肌腱蛋白C(TNC)酶联吸附测定试剂盒
溴化铥(III) 无水,粉末, 99.99%Anti-MSH-2/FITC 荧光素标记错配修复蛋白2抗体IgG鸡周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶联吸附测定试剂盒
化铥(III) 无水,粉末, 99.9% metals basisAnti-MSK1/FITC 荧光素标记有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG鸡核因子κB (NFκB)酶联吸附测定试剂盒
硫铥(III),八水 99.9% metals basisAnti-Phospho-MSK1 (Ser360)/FITC 荧光素标记化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG鸡半凝集素3(GAL3)酶联吸附测定试剂盒
硫铥 99.99%Anti-Phospho-MSK1 (Ser212)/FITC 荧光素标记化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG鸡红膜蛋白(EMP)酶联吸附测定试剂盒
二氢化钛 -325目,99%Anti-Phospho-MSK1 (Ser376) /FITC 荧光素标记化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG鸡核糖核酶III(RNASEN)酶联吸附测定试剂盒
化钨 99%Anti-Phospho-MSK1 (Thr581) /FITC 荧光素标记化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG鸡胰淀素(IAPP)酶联吸附测定试剂盒
二硅化钽 粉末,99.99% metals basisAnti-MSLN /FITC 荧光素标记间皮素抗体IgG鸡REST协阻抑因子3(RCOR3)酶联吸附测定试剂盒
硫化钽 99.8% metals basisAnti-MST1/FITC 荧光素标记蛋白激酶MST抗体IgG鸡微球粒蛋白1(MCRS1)酶联吸附测定试剂盒
氧化钨(IV) -100目,99.99% metals basisAnti-Phospho-Mst1 (Thr183)/Mst2 (Thr180) /FITC 荧光素标记化蛋白激酶MST抗体IgG鸡早期生长应答蛋白4(EGR4)酶联吸附测定试剂盒
钒粉 99.9% metals basis,100-200 meshAnti-MT/FITC 荧光素标记金属硫蛋白抗体IgG鸡促肾上腺皮质释放结合蛋白(CRHBP)酶联吸附测定试剂盒
五氧化二钒 AR,99.0%（剧品）Anti-MTA1/FITC 荧光素标记肿瘤转移相关蛋白1抗体IgG鸡糖化血红蛋白(HbA1c)酶联吸附测定试剂盒
五氧化二钒 CP,99.0%（剧品）Anti-MTHFR/FITC 荧光素标记亚四氢叶还原酶抗体IgG鸡谷胱甘肽S转移酶α4(GSTα4)酶联吸附测定试剂盒
PL45细胞UDP葡萄糖神经酰葡萄糖转移酶Elisa试剂盒荧光素PE标记猪胰岛素蛋白Goat Anti-Mouse IgM/Cy3 Cy3标记的羊抗小鼠IgM
酯化酶Elisa试剂盒荧光素PE标记血蓝蛋白Goat Anti-Mouse IgM/Bio 生物素标记的羊抗小鼠IgM
酪蛋白Elisa试剂盒荧光素PE标记人血白蛋白Goat Anti-Mouse IgM/APC APC标记的羊抗小鼠IgM
大豆球蛋白Elisa试剂盒荧光素PE标记胰糜蛋白酶Goat Anti-Mouse IgM/AP 碱性酶（AP）标记的羊抗小鼠IgM
β-伴大豆球蛋白Elisa试剂盒荧光素APC标记小鼠IgG(流式同型对照)Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗小鼠IgM
八氢番茄红素Elisa试剂盒荧光素APC标记大鼠IgG(流式同型对照)Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的羊抗小鼠IgM
还原型辅酶IIElisa试剂盒荧光素APC标记牛IgGGoat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗小鼠IgM
血栓前体蛋白Elisa试剂盒荧光素APC标记牛IgMGoat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗小鼠IgM
二氧化酶Elisa试剂盒荧光素APC标记鸡IgGGoat anti-Mouse IgM whole serum 羊抗小鼠IgM抗血清
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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