实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
|
产品名称
|
规格
|
货号
|
|
ARPE-19细胞
|
T25
|
FS-X3492
|
产品名称：视网膜色素上皮细胞；ARPE-19
形态特性：上皮样
生长特性：贴壁生长
特征特性：该细胞系源自于一名19岁车祸罹难的健康男性的视网膜组织，由AmyAotaki-Keen建系于1986年。该细胞系表达视网膜色素细胞特有的分子标记如胞内视黄醛结合蛋白和PRE-65。
培养条件：DMEM+10%FBS
传代方法：1：2传代
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
(S)-(+)-2-哌 99％Anti-P-cadherin/FITC 荧光素标记P-钙粘附分子抗体IgG绵羊白介素35(IL-35)酶联吸附测定试剂盒
(2-) 97%Anti-R-cadherin /FITC 荧光素标记R-钙粘附分子抗体IgG绵羊泛素结合酶E2C(UBE2C)酶联吸附测定试剂盒
N-苄甘氨乙酯 97%Anti-PCNA/FITC 荧光素标记兔抗增值核抗原抗体IgG绵羊胰高血糖素(GC)酶联吸附测定试剂盒
吡啶-N-氧化物 95%Anti-PCNA/FITC 荧光素标记增殖核抗原抗体IgG绵羊α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP)酶联吸附测定试剂盒
盐喹那普利 98%Anti-PCNA/FITC 荧光素标记增殖核抗原抗体IgG绵羊葡萄糖激酶(GCK)酶联吸附测定试剂盒
(R)-(-)-3- 氨吡咯烷 98%Anti-PCNA/FITC 荧光素标记增殖核抗原抗体IgG绵羊XV 型胶原(COL15)酶联吸附测定试剂盒
氮化钽 5 μm,99.5% metals basisAnti-PCX/FITC 荧光素标记足特异蛋白抗体绵羊前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2/COX-2)酶联吸附测定试剂盒
4'-叔丁-4-丁酰 98%Anti-PD-1/FITC 荧光素标记程序性死亡1抗体IgG绵羊球蛋白E Fc段受体I(FcεR I)酶联吸附测定试剂盒
化钡，二水 99.99% metals basisANti-PDCD4/FITC 荧光素标记凋亡相关蛋白4抗体IgG绵羊原钙黏素β16(PCDHβ16)酶联吸附测定试剂盒
碳钡 99.95% metals basisAnti-TFAR19/PDCD5 /FITC 荧光素标记凋亡相关蛋白TFAR19抗体IgG绵羊滑行蛋白β(TXLNb)酶联吸附测定试剂盒
氢氧化钡，八水 AR，98%Anti-PDE4D/FITC 荧光素标记二酯酶4D抗体IgG绵羊β素(bTC)酶联吸附测定试剂盒
碳锶 99.95% metals basisAnti-PDEF/FITC 荧光素标记上皮特异性ETs转录因子抗体IgG绵羊线粒体超氧化物歧化酶2(SOD2)酶联吸附测定试剂盒
6-溴-2-四氢萘酮 97%Anti-PDGF-A/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子-A抗体IgG绵羊胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)酶联吸附测定试剂盒
间酚 INDAnti-PDGF-B/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子-B抗体IgG绵羊胎盘碱性酶(PLAP/ALPP)酶联吸附测定试剂盒
化氢-乙溶液 化氢含量: 30-40%Anti-PDGF-BB/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子-BB抗体IgG绵羊干扰素诱导Tα亚族趋化因子 (I-TAC)酶联吸附测定试剂盒
ARPE-19细胞25羟维生素D3Elisa试剂盒金标记蛋白A(10nm/15nm)GM1(GS) 神经节苷酯抗体
3,4二羟Elisa试剂盒羊抗人球蛋白AGlyR alpha 1/2/3 甘氨受体alpha 1/2/3型抗体
4-羟壬烯Elisa试剂盒兔抗人k-链Glypican 6 脂酰蛋白聚糖-6抗体
5羟吲哚乙Elisa试剂盒Glypican 5 脂酰蛋白聚糖-5抗体
5羟色Elisa试剂盒Glypican 4 脂酰蛋白聚糖-4抗体
5-羟色受体7Elisa试剂盒glypican 3/GPC3 脂酰蛋白聚糖-3抗体
6酮前列腺素F1αElisa试剂盒glypican 1 脂酰蛋白聚糖-1抗体
8羟脱氧鸟苷Elisa试剂盒Glycophorin C/CD236 糖蛋白C抗体
8异前列腺素Elisa试剂盒Glycogen synthase 2 葡萄糖合成酶2抗体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报