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产品资料

多功能DNA纯化回收试剂盒

多功能DNA纯化回收试剂盒
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:多功能DNA纯化回收试剂盒
  • 产品型号:A-Hc2025
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
多功能DNA纯化回收试剂盒公司正在出售的产品:游离RNA提取试剂盒(中提)组织DNA提取试剂盒拭子RNA提取试剂盒粪便DNA提取试剂盒去内**中大量质粒提取试剂盒中大量DNA载体提取试剂盒磁珠法组织核酸提取试剂盒(手自通用)
产品描述

商品属性:


货号

规格

产品名称

A-Hc2025-100次

100次

多功能DNA纯化回收试剂盒

A-Hc2025-100 次×2

100 次×2

多功能DNA纯化回收试剂盒

储存条件:


多功能DNA纯化回收试剂盒保存条件:本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。

产品介绍:


在高离序盐存在的情况下,DNA 片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,*后低盐、高 pH 值的洗脱缓冲液将纯净 DNA 从硅基质膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了上等溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖 DNA 回收、PCR 产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用。
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测 pH 值变化从而达到*佳结合效果,大大提高回收效率。
5.简单快速、使用方便。
适用范围:
适用于琼脂糖凝胶 DNA 回收、PCR 反应产物纯化回收、酶切产物 DNA 片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA 样品浓缩等。

 

注意事项:



1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在 37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。使用前应该恢复到室温。

2.储��于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
4.溶胶液/结合液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。回收纯化的 DNA片段一般在 100bp 到 40kb 之间,过长、过短片段的回收效率迅速降低。
5.回收 DNA 的量和起始 DNA 的量、洗脱体积、DNA 片断大小有关。一般 1-20μg,100bp-5kb 的 DNA 片段,回收率可高达 85%-95%。
6.切胶回收时,紫外灯观察对 DNA 片段有损坏作用,应该尽可能使用能量低的长波紫外线,并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
7.pH 值≤7.5 时,吸附膜吸附 DNA 的效率*高。如果切下来的凝胶中含有电泳缓冲液太多,造成溶胶后溶胶液 pH 偏高,会导致回收率降低。溶胶后,如果溶胶液依旧保持黄色,说明 pH 正常;如果变成橘红色或者淡紫色,说明 pH 偏高,可在胶充分溶解后加 5-10μl 3M 醋酸钠(pH5.2)将 pH 值调到 5-7(黄色)。
8.洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保 pH 大于 7.5,pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱,DNA 片段应该保存在-20℃。DNA 片段如果需要长期保存,可以用 TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mMEDTA,pH 8.0),但是 EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
自备试剂:无水乙醇


操作步骤:


提示:**次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1.琼脂糖凝胶 DNA 回收:
1)在长波紫外灯下,用干净刀片将所需回收的 DNA 条带切下,尽量切除不含 DNA的凝胶,得到凝胶体积越小越好。
2)将切下的含有 DNA 条带凝胶放入 1.5ml 离心管,称重。
3)加 3 倍体积溶胶/结合液 DB。(凝胶重为 100mg,则加入 300μl 溶胶液)如果凝胶浓度大于 2%,应加入 6 倍体积溶胶液。
4)56℃水浴放置 10min(或直至胶完全溶解)。每 2-3min 涡旋震荡一次帮助加速溶解。
5)将上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中(吸附柱放入收集管中),室温放置1min ,12,000rpm 离心 30-60sec,倒掉收集管中的废液。
6)加入 500μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心 30sec,弃掉废液。
7)重复操作步骤 6。
8)将吸附柱 EC 放回空收集管中,12,000rpm 离心 2min,尽量去除漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
9)取出吸附柱 EC,放入一个干净的离心管中,室温放置数分钟。
10)在吸附膜的中间部位滴加洗脱缓冲液 EB(洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中加热效果更好),室温放置 2min,12,000rpm 离心 1min。如果需要较多量 DNA,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心 1min。(注意:洗脱体积不应小于 30μl,体积过少影响回收效率)
2.PCR 产物或者酶切片段等 DNA 纯化:
1)每 100μlPCR 扩增后体系或者酶切后体系加入 500μl 溶胶/结合液 DB,充分混匀。(如果初始体系小于 100μl,请事先用双蒸水调整至 100μl)。
2)将上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中(吸附柱放入收集管中),室温放置 1min,12,000rpm 离心 30-60sec,倒掉收集管中的废液。
3)从此步骤开始和琼脂糖凝胶 DNA 回收的操作步骤 6-10 完全一致,请参见琼脂糖凝胶 DNA 回收的操作步骤 6-10。

公司正在出售的产品:


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