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产品名称
A-Hc2025-100次
100次
多功能DNA纯化回收试剂盒
A-Hc2025-100 次×2
100 次×2
储存条件:
多功能DNA纯化回收试剂盒保存条件:本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
产品介绍:
在高离序盐存在的情况下,DNA 片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,*后低盐、高 pH 值的洗脱缓冲液将纯净 DNA 从硅基质膜上洗脱。 产品特点: 1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产��剂盒膜质量不稳定的弊端。 2.使用了上等溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。 3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖 DNA 回收、PCR 产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用。 4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测 pH 值变化从而达到*佳结合效果,大大提高回收效率。 5.简单快速、使用方便。 适用范围: 适用于琼脂糖凝胶 DNA 回收、PCR 反应产物纯化回收、酶切产物 DNA 片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA 样品浓缩等。
注意事项:
1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在 37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。使用前应该恢复到室温。
操作步骤:
提示:**次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入! 1.琼脂糖凝胶 DNA 回收: 1)在长波紫外灯下,用干净刀片将所需回收的 DNA 条带切下,尽量切除不含 DNA的凝胶,得到凝胶体积越小越好。 2)将切下的含有 DNA 条带凝胶放入 1.5ml 离心管,称重。 3)加 3 倍体积溶胶/结合液 DB。(凝胶重为 100mg,则加入 300μl 溶胶液)如果凝胶浓度大于 2%,应加入 6 倍体积溶胶液。 4)56℃水浴放置 10min(或直至胶完全溶解)。每 2-3min 涡旋震荡一次帮助加速溶解。 5)将上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中(吸附柱放入收集管中),室温放置1min ,12,000rpm 离心 30-60sec,倒掉收集管中的废液。 6)加入 500μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心 30sec,弃掉废液。 7)重复操作步骤 6。 8)将吸附柱 EC 放回空收集管中,12,000rpm 离心 2min,尽量去除漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。 9)取出吸附柱 EC,放入一个干净的离心管中,室温放置数分钟。 10)在吸附膜的中间部位滴加洗脱缓冲液 EB(洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中加热效果更好),室温放置 2min,12,000rpm 离心 1min。如果需要较多量 DNA,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心 1min。(注意:洗脱体积不应小于 30μl,体积过少影响回收效率) 2.PCR 产物或者酶切片段等 DNA 纯化: 1)每 100μlPCR 扩增后体系或者酶切后体系加入 500μl 溶胶/结合液 DB,充分混匀。(如果初始体系小于 100μl,请事先用双蒸水调整至 100μl)。 2)将上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中(吸附柱放入收集管中),室温放置 1min,12,000rpm 离心 30-60sec,倒掉收集管中的废液。 3)从此步骤开始和琼脂糖凝胶 DNA 回收的操作步骤 6-10 完全一致,请参见琼脂糖凝胶 DNA 回收的操作步骤 6-10。
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