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产品名称
A-Hc2059-1ml(10mg/ml)
1ml(10mg/ml)
单体亲和素磁珠
储存条件:
·快捷,简单的一步法高通量操作;无需纯化柱或过滤器,或重复移液、离心等操作 ·极高的结合能力,在温和的条件下洗脱结合的生物素化分子 ·在温和的洗脱条件下纯化生物素化样品 ·极小的非特异性结合 ·对样本体积要求低,便于自动化操作 ·成本低:只有市场同类产品磁珠价格的一半 ·磁珠至少可以重复使用5次
产品介绍:
单体亲和素磁珠亲和素(或链霉亲和素)和生物素之间表现的相互作用,是已知的非共价相互作用*高的一种。亲和素、链霉亲和素、 单体亲和素及其类似物已成为探针研究实验中强大的亲和配体工具,被广泛应用于生化分析、诊断、亲和纯化和**递送。Monomer Avidin Magnetic Beads是一种高度均匀的超顺磁性微球,表面包裹着高密度的超纯(>97%)亚单位单体亲和素。单体亲和素源自天然四聚体蛋白,它保留了与天然亲和素相同的生物素结合特异性,但其生物素结合亲和力会有显著降低(kD=~10-8 M)。因此,通过使用温和的洗脱条件,例如含有2 mM 生物素的缓冲液,就可以很容易地从单体亲和素中洗脱结合的生物素化分子。本款磁珠经过专门设计、测试和质量控制,可用于**沉淀、细胞分选,以及从细胞裂 解液或杂交反应中快速一步捕获生物素化分子,如DNA、RNA、抗体或蛋白质。
缓冲液:
·1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸钠, 0.15 M 氯化钠; pH 7 ) ·1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8) ·1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物素溶于 PBS) 磁力分离器(适用于手动操作):根据实验时生物样品的体积,使用者可以选择以下不同型号的磁力分离器: 8 孔磁力架可以容纳 8 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管 ; 24 孔磁力架可以容纳 24 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管; 4 孔磁力-15 可以容纳 4 个单独的15ml 离心管; 4 孔磁力架-50 可以容纳四个单独的 50 ml 离心管。
操作步骤:
操作过程中实验体积可根据需要放大或者缩小 提示:在纯化生物素化蛋白质、多肽和其他分子之前。用户应将试剂盒中的所有试剂温度 平衡至室温,并用双蒸馏水配制 1x 工作溶液。 1. 轻轻震动装有磁珠的试剂瓶,直到磁珠完全悬浮。将 50µl 磁珠转移到新试管中。 提示:客户应根据每个实验粗样品中生物素化分子的数量,根据经验确定*佳的磁珠 使用量。过多的磁珠会导致背景更高;磁珠使用量少会造成产量降低。我们建议纯化50μg 生物素化分子添加 50μl 完全悬浮的磁珠。 2. 将试管放在磁力分离器上1 分钟。当磁珠完全沉淀时,去除上清液。取下试管加入四倍 磁珠体积的d2H2O,充分混合。并将试管再次置于磁力分离器上1 分钟,完全去除上清 液。 3. 按照步骤2 所述方式,用四倍磁珠体积的1x PBS 缓冲液清洗磁珠。 4. 加入���倍磁珠体积的1xBlocking / Elution Buffer,通过涡旋充分混合,并在室温下培养5 分钟。将试管放在磁力分离器上1 分钟。完全去除上清液。 5. 加入六倍磁珠体积的1xRegenerationBuffer,通过涡漩充分混合,并将试管放在磁力分离 器上1 分钟。完全去除上清液。 6. 加入四倍磁珠体积的1x PBS Buffer,并按照步骤2 所述方式清洗磁珠。这些磁珠可以随时使用。 提示:必须立即使用磁珠,否则粘合能力将显著降低。 7. 向磁珠中加入含有生物素化分子的样品,通过移液器吹吸充分混合,并在室温下缓慢旋转培养30-60 分钟。 8. 将试管放在磁力分离器上,保持试管留在分离器上的同时去除上清液。如步骤 2 所示, 用1x PBS 清洗磁珠,直到在280 nm 处洗脱液的吸光度接近背景水平(OD280<0.05)。 9. 加入一倍磁珠体积的Blocking/Elution Buffer,通过移液器吹吸充分混合,并在室温下培养 5-10 分钟,将与磁珠结合的生物素化分子洗脱下来。
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