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货号
规格
产品名称
A-PJ1087-35KU
35KU
T4 DNA 连接酶
储存条件：
T4 DNA 连接酶储存：-20°C 可保存 2 年。
产品介绍：
T4 DNA Ligase 可催化相邻 DNA 链的 5’-P 末端和 3’-OH 末端以磷酸二酯键结合的反应，需 ATP 作辅酶，不仅 可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的 DNA 的连接，也 可以催化 DNA 与 RNA 之间以及少数 RNA 之间的连接。可 应用于在粘性末端或平末端连接双链 DNA 分子，也可应用 于修补双链 DNA、RNA 或 DNA RNA 杂交体上的缺口。
活性定义：
16°C 反应 30 分钟条件下，使 1pmol 的粘性末端 DNA 连接所需要的酶量定义为 1Unit。 失活：65°C，10 分钟。 10×T4 Ligase Buffer：500 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mMMgCl2, 25mM DTT, 5mM ATP.
操作方法：
1. 按以下组分配制反应体系 10×T4 Ligase Buffer 2 μl 载体 50 ng(0.2-1pmol) 插入片段 1-50 ng(0.2-10pmol) T4 DNA Ligase(200 U/μl) 1 μl ddH2O Up to 20 μl 注意：两个片段的连接时，通常载体与插入片段的摩尔比为1:3（但该比例并非**严谨，在 1:1-1：10 范围内均可获得理想的实验结果），提取根据片段大小与浓度，计算其摩尔浓度。 2. 如为粘末端连接反应， 22°C （16-37°C）连接 30min，连接产物直接用于转化（或冻存于-20°C）。
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