商品属性:
货号
规格
产品名称
A-PJ1088-2000U
2000U
ssDNA/RNA环化连接酶
A-PJ1088-20KU
20KU
储存条件:
ssDNA/RNA环化连接酶储存:-20℃可保存 3 年。 产品介绍: ssDNA/RNA CircLigase 为热稳定的 DNA/RNA 连接 酶,不依赖于 ATP,可催化单链 DNA 或单链 RNA 的分子内 环化。环化反应中,要求催化底物单链 DNA/RNA 具有 5’- 磷酸基团和 3’-OH 基团。对于大于 15nt 的单链底物,该酶 都能高效的连接。 活性定义: 65°C 1h 条件下,催化 1pmol 5’-磷酸化的 ssDNA 底物环化,所需的酶量定义为 1Unit。 反应实例: 1. 按以下组分配制反应液 CircLigase (100 U/μl) 1 μl 5’磷酸化 ssDNA/RNA 10-100 pmol 10×CircLigase Buffer 2 μl 50mM MnCl2 1 μl ddH2O Up to 20 ul 65°C 孵育 1h 进行环化反应。 2. 失活反应 反应结束后,可加入终浓度 10mM EDTA 终止反应。或采用 加热方式 85℃ 10min 加热失活。 使用注意事项: (1) 环化底物 ssDNA 或 RNA 必须带有 5’磷酸基团,3’端含有 OH。 (2) 环化体系中的 ATP 浓度高于 20μM 以上时会极大抑制环化效率,甚至导致环化失败。因此建议底物为纯化产物。 (3) 由于本酶提高了耐热性,在 65℃条件下进行连接反应,测试中 Betain 无益于连接效率提升。 (4) 本酶主要进行分子内环化连接,分子间的连接未检测到。 (5) 本酶对 ssDNA 和 RNA 的环化效率极高,多数情况下,90%以上的底物被环化。未被环化的 ssDNA 可通过加入 5U的 Exonuclease I,37°C 消化 15min 去除,以获得高纯度的环化 ssDNA。未环化的 ssRNA,将稍后给出去除方案。 (6) 本酶可以连接 15nt 以上的核苷酸,更长的产物连接参数, 将稍后给出测试报告及 protocol。 (7) 对于连接底物量较少的实验来讲,推荐缩小体系,而不是减少酶的用量。在小体系实验时注意体系的蒸发,可加入矿物油以防止蒸发。 公司正在出售的产品:
产品介绍:
ssDNA/RNA CircLigase 为热稳定的 DNA/RNA 连接 酶,不依赖于 ATP,可催化单链 DNA 或单链 RNA 的分子内 环化。环化反应中,要求催化底物单链 DNA/RNA 具有 5’- 磷酸基团和 3’-OH 基团。对于大于 15nt 的单链底物,该酶 都能高效的连接。
活性定义:
65°C 1h 条件下,催化 1pmol 5’-磷酸化的 ssDNA 底物环化,所需的酶量定义为 1Unit。
反应实例:
1. 按以下组分配制反应液 CircLigase (100 U/μl) 1 μl 5’磷酸化 ssDNA/RNA 10-100 pmol 10×CircLigase Buffer 2 μl 50mM MnCl2 1 μl ddH2O Up to 20 ul 65°C 孵育 1h 进行环化反应。 2. 失活反应 反应结束后,可加入终浓度 10mM EDTA 终止反应。或采用 加热方式 85℃ 10min 加热失活。 使用注意事项: (1) 环化底物 ssDNA 或 RNA 必须带有 5’磷酸基团,3’端含有 OH。 (2) 环化体系中的 ATP 浓度高于 20μM 以上时会极大抑制环化效率,甚至导致环化失败。因此建议底物为纯化产物。 (3) 由于本酶提高了耐热性,在 65℃条件下进行连接反应,测试中 Betain 无益于连接效率提升。 (4) 本酶主要进行分子内环化连接,分子间的连接未检测到。 (5) 本酶对 ssDNA 和 RNA 的环化效率极高,多数情况下,90%以上的底物被环化。未被环化的 ssDNA 可通过加入 5U的 Exonuclease I,37°C 消化 15min 去除,以获得高纯度的环化 ssDNA。未环化的 ssRNA,将稍后给出去除方案。 (6) 本酶可以连接 15nt 以上的核苷酸,更长的产物连接参数, 将稍后给出测试报告及 protocol。 (7) 对于连接底物量较少的实验来讲,推荐缩小体系,而不是减少酶的用量。在小体系实验时注意体系的蒸发,可加入矿物油以防止蒸发。
公司正在出售的产品:
拭子DNA磁珠法提取试剂盒
人疱疹病毒7型PCR试剂盒
中量浆DNA磁珠法提取试剂盒(M)
白前染料法PCR鉴定试剂盒
快速DNA提取试剂盒(带证,煮沸法)
榛子PCR检测试剂盒
极高热稳定单链结合蛋白
产气荚膜梭菌C类磷脂mei基因(283bp)常规PCR检测试剂盒
中大量DNA载体提取试剂盒
螺杆菌通用PCR试剂盒
游离DNA提取试剂盒(小提)
禽腺病毒(I群)PCR试剂盒
液微生物核酸提取试剂盒
禽腺病毒C种4型(FADV-C-4)核suan检测试剂盒
液DNA提取试剂盒(小提)
罗斯河病毒PCR检测试剂盒
小量质粒提取试剂盒
轮状病毒(B组)PCR检测试剂盒
细胞DNA提取试剂盒(磁珠法)
通用/H亚型(AIV-U/AIV-H)核suan检测试剂盒
微量细胞DNA提取试剂盒(磁珠法)
猪链球菌PCR检测试剂盒
探针法荧光定量PCR试剂盒
单丝氨suan蛋白激mei1ELISA试剂盒
石蜡组织基因组 DNA 快速提取试剂盒
层黏连蛋白受体1ELISA试剂盒
全microRNA提取试剂盒
ssDNA/RNA环化连接酶稳定蛋白ELISA试剂盒
凝块RNA提取试剂盒
超敏热休克蛋白60ELISA试剂盒