商品属性:
货号
规格
产品名称
A-PJ1167-50T
50T
15min高产全血基因组DNA提取试剂盒
储存条件:
15min高产全血基因组DNA提取试剂盒保质期为 2 年。
产品介绍:
该试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从抗凝全血样本中纯化出高纯度的基因组 DNA,*大限度的去除蛋白、色素、脂类等杂质污染。应用本试剂盒获取的 DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280 为 1.6-1.9。应用本试剂盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern 杂交等多种分子生物学实验。
注意事项:
(1) 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。 (2)gDNA LB1,储存时可能会有白色结晶沉淀,放置于56℃水浴锅溶解后,不影响使用效果。 (3)蛋白酶 K(20 mg/ml)长期保存请储存于-20℃,短期室温保存(6 个月),其它组分储存于室温。 操作方法
(1)样本处理(1.5 或 2 ml EP 管中处理)人抗凝全血:吸取 0.2~0.8 ml 抗凝全血加入到 800 μl 红细胞裂解液中上下颠倒混合均匀,13000rpm 离心 30s,去上清,留白细胞沉淀,用 50 μl 水重悬白细胞沉淀(有少量红细胞残留并不影响 DNA 的产量,如仍然有大量红细胞未裂解,可再次用红细胞裂解液将红细胞裂解)。**细胞分离液分离出的白细胞:直接吸取 50~80 μl 白细胞。有核红细胞抗凝全血(禽血):吸取 10 μl 抗凝全血加入到50 μl 无菌水中,漩涡震荡混合均匀。 (2)向上述准备好的样品溶液中加入 100 μl gDNA LB1 和20 μl 蛋白酶 K 漩涡混合均匀 10s,56℃水浴锅中消化5~30min(长时间消化可提高 DNA 的产量)。 (3)加入 700 μl gDNA BB2 漩涡震荡混合均匀 1min,肉眼观察有无未溶解的血凝块,如果无血凝块,则直接倒入到吸附柱中,13000rpm 离心 1min。注意:如果有未溶解的血凝块,则短离心去除血凝块后,再倒入到吸附柱中,进行后续离心操作。 (5)倒掉废液,向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer,13000rpm 离心 15s。重复此步骤一次。 (6)将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心 2min,将残留的乙醇彻底甩干。 (7)将吸附柱芯放入到 1.5ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer(DNA Elution Buffer 预热到 65℃将提高洗脱产量),室温放置 1min,13,000rpm 离心1min,洗脱液即为基因组 DNA,冷冻保存。
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