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高效液相色谱仪测定猪尿中盐酸克伦特罗含量

高效液相色谱仪测定猪尿中盐酸克伦特罗含量

盐酸克伦特罗俗称“瘦肉精”，生猪被饲喂添加了盐酸克伦特罗的饲料，其屎液可检出盐酸克伦特罗。采用高效液相色谱仪测定。按本处理方法进行试验的结果良好。

1、仪器与试剂

高效液相色谱仪，配紫外检测器。

超声波水浴，

离心机：4000r／min，

恒温水浴箱。

乙醇，乙醚，0.01mol／L 磷酸二氢钠溶液；

2mol／L 氢氧化钠溶液：20g氢氧化钠 (优级纯 )溶于250ml水中；

无水硫酸钠。

所有试剂除了注明外，均为分析纯。

盐酸克伦特罗标准溶液：储备液，500ug／ml：5mg 盐酸克伦特罗溶于超纯水中，加甲醇 lmL，然后用超纯水定容10ml；

工作液：将储备标准液用超纯水经两步稀释为2.0ug/ml的工作标准液。

2、样品处理

吸取猪屎10m于125ml分液漏斗中，用2mol／mL NaOH溶液调 pH 值至 11～12(约8滴)，分别用30、25ml乙醚萃取2次，每次振摇2min，待分层后把乙醚层 (上层 )通过无水硫酸钠(2～3s)的漏斗放入100ml蒸发皿中。然后用少许己醚清洗分液漏斗并淋洗无水硫酸钠，淋洗液放入蒸发皿中将蒸发皿置水搭上(约60℃)挥发蒸干后，再用60％乙醇溶液分3次将残留物洗入定容瓶中并定容2ml，然后经0.5um双层滤膜离心过滤后，供高效液相色谱仪测定。

3、色谱条件

色谱柱：C18，200mm ×4.6mm，

检测波长：243nm；

柱温：28℃ ；

进样量：20ul；

流动相：0.01m ol／L，磷酸二氢钠+ 甲醇 = 67 + 33 ；

流速：0.8ml／min。

按上述色谱条件，采用外标法，以保留时间定性，并以盐酸克伦特罗的特征紫外吸收光谱对照样品的扫描光谱进行确认，然后根据样品峰面积与标准峰面积比较计算盐酸克伦特罗含量。

高效液相色谱仪测定猪尿中盐酸克伦特罗含量

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