内部资料|1381291-36-6|USP7-IN-1参考用途

常用名

USP7-IN-1

英文名

USP7-IN-1

CAS号

1381291-36-6

分子量

425.90800

密度

无资料

沸点

无资料

分子式

C23H24ClN3O3

熔点

无资料

闪点

无资料

体外研究

USP7-IN-1（实施例2）是USP7的选择性和可逆抑制剂，IC50为77μM，并且对USP8，USP5，Uch-L1，Uch-L3或胱天蛋白酶3没有抑制作用.USP7-IN-1抑制HCT116细胞的增殖，GI50为67μM[1]。

激酶实验

USP7在USP缓冲液（50mM Tris HCl; 0.5mM EDTA（乙二胺四乙酸）; 5mM DTT; 0.01％Triton X-100;牛血清白蛋白0.05mg / mL pH7.6）中稀释。将化合物原液（10mM）在-20℃下储存在DMSO中。在不同浓度下测试化合物（包括USP7-IN-1）：从200μM至91nM。反应在Black 384孔板中重复进行（10μL*终反应体积）。 USP7的底物浓度为300nM Ub-AMC。特异性测定中酶（USP7）的浓度为100pM。确定浓度以在固定底物浓度下在初始速度下进行特异性测定。将化合物与酶在25℃下预孵育30分钟。通过向含有在测定缓冲液中稀释的酶（+/-化合物）的平板中加入底物来引发反应。将反应在37℃下温育60分钟。加入乙酸（终浓度100mM）终止反应。读数在Pherastar荧光读数器上进行。 λ发射380 nm; λ激发= 460nm。将数据（平均值+/-标准偏差）分析为对照的％（无化合物），并使用GraphPad绘制为相对于化合物浓度的Log的百分比。数据拟合为S形模型（可变斜率）[1]。