禽流感病毒H7N4亚型试剂盒荧光PCR法

产品名称：禽流感病毒H7N4亚型试剂盒荧光PCR法
产品货号：XG-R63251
规格：50T
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
储存条件：-20℃以下，有效期12个月。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
应用案例：
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

PCR服务：
公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

人脑血管平滑肌细胞总RNAHBVSMC tDNA牛血红蛋白质量规格：BRHemoglobin

山羊皮肤成纤维样细胞;DG-S1 胚肾细胞，AAV-293细胞 HP615细胞，615小鼠肺癌瘤株聚乙二醇10000质量规格：分子量9,000~11,000PEG 10000

人干细胞因子单克隆抗体细胞株;AMS2(SCF3)DL-苹果酸质量规格：>98%,BRDL-Malic acid

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) D-酪氨酸质量规格：>98%,BRD-Tyrosine

CL-0301M-NFS-60 (小鼠白血病细胞G-CSF依赖性)5×106cells/瓶×2D-组氨酸质量规格：>98%,BRD-Histidine
C57BL/6小鼠骨髓间质干细胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cellsAc-YVAD-肽核酸Ac-YVAD-pNA质量规格：>95%,BR

HME6细胞，人色素瘤细胞 动物双歧杆菌 EB病毒转化的人B细胞;KMY0919β-丙内酯(>95.0%(GC)(T))β-Propiolactone质量规格：>95.0%(GC)(T)

UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2DL-丙交酯(>98.0%(T))DL-Lactide质量规格：>98.0%(T)

Hut-102(人皮肤T瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株 EB病毒转化的人B细胞;KMY1022L-(-)-交酯(>98.0%(T))L-(-)-Lactide质量规格：>98.0%(T)

人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]δ-戊内酯(>98.0%(GC))δ-Valerolactone质量规格：>98.0%(GC)
615小鼠网织细胞性白血病瘤株;L615 小鼠肾足突细胞完全培养基 100mL10-脱乙酰巴卡亭质量规格：>98%,BR10-Deacetylbaccatin III

人绒毛膜内皮细胞 Human维生素B1(标准品)质量规格：HPLC≥99%，标准品vitamin B1

EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 维生素B1质量规格：>99%,USPVitamin B1

禽流感病毒H7N4亚型试剂盒荧光PCR法人无色素睫状上皮细胞HNPCEpiC维生素B12(标准品)质量规格：HPLC≥99%，标准品vitamin B12

NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)10-Undecyn-1-ol
人尿道上皮细胞(HUC)(5×105) 人羊膜上皮细胞 Human坚牢红盐，英文名或英文缩写：Fast red GG salt，级别：高，65%，苹果来源，规格：1克

大鼠胰岛β细胞瘤细胞;RIN-m5F(S)-(-)-叔丁基亚磺酰安 (S)-(-)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 343338-8-3

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) L-酪安醋;;;L-β-队羌本基-α-安基炳醋;L-干酪安基醋 L-Tyrosinq;(S)-2-cMino-3-(4-xy7noxyphqnyl)propionic ccid;3-(4-xy7noxyphqnyl)-L-clcninq;L-α-cMino-β-p-xy7noxyphqnylpropionic ccid;L-α-cMino- p-xy7noxyxy7nocinncMic ccid 60-18-4

T-107A中性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)1mLGENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE PAGE PLUS, 6M 尿素生物技术级500MLCOLD

HEp-2细胞，人喉表皮样癌细胞 人脐静脉内皮细胞,HUVE-12/CRL2480细胞 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-2162778-12-5N，N-二甲基对本草酸盐N,N-Dimetxyl-1,4-pxenylenediamine oxalate