产品名称:粗球孢子菌试剂盒荧光PCR法
产品货号:XG-R63331
规格:50T
分类:荧光PCR法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
应用案例:
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
PCR服务:
公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
人结肠平滑肌细胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠成纤维细胞 Rattus物质P(7-11)质量规格:>95%,BRSubstance
P (7-11)
猪肾传代细胞;IBRS-2TA-0910,他替瑞林质量规格:>95%,BRTA-0910,
taltirelin
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照) 促甲状腺释放,游离酸质量规格:>95%,BRTRH,
Free Acid
CL-0157MG-63(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2尿皮质Ⅲ,小鼠质量规格:>95%,BRUrocortin
III, mouse
L-M TK细胞,鼠胸腺激酶缺陷细胞株 人B细胞瘤细胞系,BJAB细胞 小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6
[Hepa1-6]戊基尼泊金质量规格:美国进口Pentyl Paraben
CTSD Others Human 人 Cathepsin D /
CTSD 人细胞裂解液 (阳性对照) Ac-rC亚1酰胺单体Ac-rC
Phosphoramidite质量规格:>98%,BR
DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞Rp-腺苷 3′,5′-环单硫代1酸酯钠盐Rp-Adenosine 3′,5′-cyclic
Monophosphorothioate, Salt 质量规格:美国进口
CMVECs微血管内皮细胞 CMVECs micro vascular
endothelial cells DMEM+10%FBSSp--腺苷 3′,5′-环单硫代1酸酯 三乙基铵盐水合物Sp-Adenosine
3',5'-cyclic monophosphorothioate triethylammonium salt hydrate 质量规格:美国进口
TNFSF12 Protein Rat 重组大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签)2-甲基硫代二1酸腺苷2-(Methylthio)adenosine
5'-diphosphate 3 salt hydrate 质量规格:美国进口
人小梁网细胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞 Mouse腺苷-2',3'-环1酸 三乙基铵盐Adenosine
2',3'-Cyclic Phosphate Triethylammonium Salt 质量规格:美国进口
IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-酚,英文名或英文缩写:4-xy7noxypyridine,级别:AR,98.5%,规格:250毫克
人肾上皮细胞完全培养基 100mL(S)-(-)-α-基-γ... (S)-(-)-3-Aminotetrahydrofuran-2-One H... 2185-3-7
250MG 通用试剂
粗球孢子菌试剂盒荧光PCR法B16F10细胞,小鼠色素瘤高转移细胞 FRhK-4(恒河猴胚肾细胞) SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19L-乳醋内盐(1-13C) L-LcCTIC
cCID, wo7ium ScLT (1-13C) 8173-81-6
CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白氧化金shēng huà shì jì容量:RT500毫升
SHG-44 (人胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 1115-69-1N-乙酰-DL-α-酸2-Acetylamino-propionic
acid
人导管癌细胞;ZR-75-11000ul无菌盒装吸头shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1毫克
IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照) 日落黄 Sunset Yellow
FCF 2783-94-0 25G 通用试剂
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]染料木皇同(-20℃) Gqnistqin 446-7-0
IGFBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP4 人细胞裂解液 (阳性对照)
TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制剂,大豆试剂级米白色冻干粉FROZENsigma
肝窦内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)20624-25-3铜试剂wo7ium
dietxyldithiocarbamate trihydrate
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