非洲猪瘟病毒试剂盒荧光PCR法

原理是由一对引物介导，能在��植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
储存条件：-20℃以下，有效期12个月。

产品名称：非洲猪瘟病毒试剂盒荧光PCR法
产品货号：XG-R63672
规格：50T
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
应用案例：
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

人结膜纤维原细胞(HConF)(5×105 )N-甲基帕罗西汀（标准品）质量规格：供检查用N-Methylparoxetine

CM-M027小鼠食管上皮细胞完全培养基100mL七氟烷（标准品）质量规格：供GC法检查用Sevoflurane

小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS 小鼠上皮细胞完全培养基 100mL二甲氧苄啶（标准品）质量规格：检查Diaveridine

小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记) Mouse美雄诺龙（标准品）质量规格：供HPLC法系统适用性试验用Mestanolone

WFIKKN2 Others Human 人 WFIKKN2 / GASP-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸达克罗宁（标准品）质量规格：含量测定Dyclonine
SLAMF7 Others Mouse 小鼠 SLAMF7 / CRACC 人细胞裂解液 (阳性对照) L-天冬氨酸二叔丁基酯盐酸盐L-Aspartic acid di-tert-butyl ester 质量规格：>98%,BR

人导管瘤细胞;BT-474S-I-G-S-L-A-KS-I-G-S-L-A-K质量规格：>95%,BR

CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人细胞裂解液 (阳性对照) SAMs肽SAMs Peptide质量规格：>95%,BR

Dami 人成巨核细胞白血病细胞猿猴病毒40大肿瘤抗原氨基段肽段Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide质量规格：>95%,BR

MHCC-97L人肝癌细胞(低转移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS生长抑制素-28Somatostatin-28质量规格：>95%,BR
NAMALWA细胞，Butt's 瘤细胞 细胞,KB-C1.5细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY0903200ul盒装吸头100U保存：-20℃

615小鼠肺癌瘤株;HP6155-溴-4-录-3-吲哚-N-酰基-β-D-安基葡糖苷(-20`C) 5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYL-N-cCqTYL-BqTc-D-GLUCOScMINIDq 2609-91-6

TNFRSF10B Others Human 人 TNFRSF10B / AILR2 / CD262 人细胞裂解液 (阳性对照) BOC-L-缬酸5克RT

人胚胎，皮肤，肌肉;M-20N-羟基-5-降1-2，3-25克RT

CNPY4 Others Human 人 CNPY4 人细胞裂解液 (阳性对照) (利福平)
T-106AIV型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL美康唑，英文名或英文缩写：Miconazole nitnate，级别：19000～119000,液体,6条带，规格：1克

小鼠胚胎成纤维细胞;MEF 小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL知母皂苷A1 Timosaponin A1 (HPLC,≥94%) 68422-00-4 10MG 标准品

HUVEC, 人脐静脉内皮细胞 Human拂青务菊酯 FLUCYTHRINcTq 7014-77-2

VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人细胞裂解液 (阳性对照) NUCLEASELIMINATORWIPES去除核酸酶纸巾生物技术级25 PackRT

大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-12082-84-0癸基基溴化铵Decyltrimetxylammonium bromide
PCR服务：
非洲猪瘟病毒试剂盒荧光PCR法公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

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