羊肺炎支原体（MO）试剂盒荧光-PCR法

储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内**的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品特点: 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤高压。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA检测试剂盒rabbitsolubleP-selectin,sP-selectin 96T/48T 罗布麻宁；夹竹桃麻素(标准品)  Acetovanillone  质量规格：GC>98%,标准品

兔子可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA检测试剂盒Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40L 96T/48T 罗布麻宁；夹竹桃麻素  Acetovanillone  质量规格：>98%,BR

兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA检测试剂盒rabbitSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1 96T/48T 虎杖甙/虎杖苷/白藜芦醇苷  Polydatin  质量规格：HPLC>97%,BR

兔子可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA检测试剂盒RabbitsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCR 96T/48T 虎杖甙/虎杖苷/白藜芦醇苷(标准品)  Polydatin  质量规格：HPLC≥98%,标准品

兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA检测试剂盒Rabbitsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1 96T/48T 十八烷醇,1-十八醇(标准品)  1-Octadecanol  质量规格：>98%,标准品

兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA检测试剂盒Rabbitsolubleadhesionmolecules,Sam 96T/48T 十八烷醇,1-十八醇  1-Octadecanol  质量规格：>98%

兔子球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒rabbitImmunoglobulinA,IgA 96T/48T Ruxolitinib (INCB018424)  Ruxolitinib (INCB018424)  质量规格：>99%

兔子球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒rabbitImmunoglobulinE,IgE 96T/48T MK-1775,MK1775   MK-1775  质量规格：>98%,Wee1激酶抑制剂

兔子球蛋白G(I羊肺炎支原体（MO）试剂盒荧光-PCR法gG)ELISA检测试剂盒rabbitImmunoglobulinG,IgG 96T/48T PD184352 (CI-1040)  PD-184352 (CI-1040)  质量规格：>99%,MEK1/2抑制剂

兔子球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒rabbitImmunoglobulinM,IgM 96T/48T 2-脱氧-D-葡萄糖  2-Deoxy-D-glucose  质量规格：>98%,BR
虎杖甙/虎杖苷/白藜芦醇苷(标准品)  Polydatin  质量规格：HPLC≥98%,标准品 兔子可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA检测试剂盒RabbitsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 96T/48T

十八烷醇,1-D-F[=4-(氨磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并恶二唑](>98.0%(N)(T))  ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]  质量规格：>98.0%(N)(T)

Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1ELISAKit 人抗载脂蛋白抗体A1(ApoA1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 二茂铁乙酸(>97.0%(GC))  Ferroceneacetic Acid  质量规格：>97.0%(GC)

HumanAldolase,ALDELISA试剂盒人缩酶(ALD)ELISA试剂盒规格：96T/48T (肼基羰基)二茂铁(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色谱标记)  (Hydrazinocarbonyl)ferrocene  质量规格：>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色谱标记

植物S腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20 二甲亚砜(>99.0%(GC))  Dimethyl Sulfoxide  质量规格：>99.0%(GC)

Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒规格：96T/48T 1,2,3,4-四氢萘(>98.0%(GC)  1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene  质量规格：>98.0%(GC)

小鼠可溶性半乳糖凝集素3结合蛋白(LGALS3BP)ELISA试剂盒 ，英文名： LGALS3BP ELISA Kit 对茴香醛乙醇溶液(含乙酸和硫酸)  p-Anisaldehyde (contains Acetic Acid, H2SO4) Ethanol Solution  质量规格：用于薄层色谱显色剂

人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA检测试剂盒HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit 96T/48T 二甲亚砜-d6 99.9原子%D(>99.0%(GC))  Dimethyl Sulfoxide-d6 99.9atom%D  质量规格：>99.0%(GC)
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株 单核细胞型瘤细胞,THP 1细胞 FaDu(人咽鳞癌细胞)2-本并噻唑shēng huà shì jì容量：5克

野生型人c-kit受体细胞株;A7d3-叔丁基-4-羌基茴香迷 3-tqrt-Butyl-4-xy7noxycnisolq 11-00-6

SERPINA7 Others Mouse 小鼠 SerpinA7 / TBG 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,3-二基奈shēng huà shì jì容量：100克

大鼠纤维母细胞;1/EJ 1-1metxylpalmitate软脂酸100克2.5N，99.5%

MERTK Others Human 人 MERTK / Mer (aa 578-872) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 142-28-91,3-二录1,3-Dichloropropane;Trimetxylene dichloride

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