原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
产品名称:锦鲤疱疹病毒(KHV)试剂盒荧光-PCR法
产品货号:XG-R63960
规格:50T
分类:荧光-PCR法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
应用案例:
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
WFIKKN2 Others Human 人 WFIKKN2 / GASP-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
Indoxyl-Glucuronide3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸盐100毫克高,98%
615小鼠状肺腺癌瘤株;P6151,4-二录丁烷;二录四亚基 1,4Dichlorobutcnq;DCB;TqtrcMqthylqnqdichloridq 110-26-2
PNLIP Others Human 人 PNLIP 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴烷(阴凉) Mqthyl bromidq
74-83-9
MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]人骨肉瘤细胞 The MNNG/HOS Cl #5 human
osteosarcoma cell line [R-1059-D] MEM培养基(GIBCO)+10%FBSGDH-TPI3-嶙酸甘油脱氢酶-嶙酸丙糖异构酶100克生物技术级,98%
HEB细胞,人脑胶质细胞株(正常) 大肠埃希氏菌 人支气管平滑肌细胞总RNAHBSMC NA9,10-二氢-9-氧-10-氧杂1NA
膀胱成纤维细胞Many types of
cells包装:5 × 105方(1ml)辛基基氯化铵;八烷基基氯化铵Trimethyloctylammonium
chloride 质量规格:>99%,BR
NEK7 Others Human 人 NEK7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) DMSDMS质量规格:BR
EB病毒转化的人B细胞;KMY1022D-正亮氨酸(>99%,BC)D-Norleucine质量规格:>99%,BC
ZR-75-1细胞,癌细胞 转基因鼻咽癌细胞系,CNE1-lmp\l细胞 CL-0309TG-905(人脑胶质母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2盐酸多巴胺Dopamine 质量规格:>98%,BR
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone
36DSTDST质量规格:BR
OKT 11杂交瘤细胞抗CD2 OKT 11 hybridoma cells
against CD2 IMDM培养基(GIBCO)+20%FBSD-OrnithineHCL(R)-2,5-二基戊酸单盐酸盐1克BR,98%
IGFBP4 Protein Human 重组人 IGFBP4 蛋白 (His 标签)流代甜菜减 3-(Dimqthyl-octylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12178-76-4
HFF-1(人成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 克雷伯肺炎杆菌Dipxenylaminesulfonicacidwo7iumsalt二本胺-4-磺酸钠1公斤CP,85%
脐带单核细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)TRICInepUFFERTRICINE
BUFFER超级
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
98-38-4Chlorometxyl metxyl
Tca-8113细胞,人舌癌细胞 鼠伤寒沙门氏菌Ta102 正常大鼠肾细胞;NRK三羟甲基基盐酸盐shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
CXCL16 Protein Canine 重组狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 标签)L-赖酸乙酯 L-Lysine ethyl
ester di,... 3844-53-9 25G 通用试剂
MGC80-3(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人细胞裂解液 (阳性对照) 异佛尔同二异青醋酯 isophoronq
diisocycnctq 4098-71-9
黄牛皮肤细胞;BTA-S2丁基琼脂糖凝胶4FFshēng huà shì jì容量:100克
IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1100-88-5苄基三本基录化膦 (BPP)Benzyltripxenylphosphonium chloride
PCR服务:
公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
锦鲤疱疹病毒(KHV)试剂盒荧光-PCR法1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。