副溶血性弧菌(VP)试剂盒荧光-PCR法

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
储存条件：-20℃以下，有效期12个月。

产品名称：副溶血性弧菌(VP)试剂盒荧光-PCR法
产品货号：XG-R63995
规格：50T
分类：荧光-PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
应用案例：
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]笼形视黄酸质量规格：美国进口Caged Retinoic Acid

HGFA Others Human 人 HGFA 人细胞裂解液 (阳性对照) 5,6-环氧-13-顺式视黄酸质量规格：美国进口5,6-Epoxy-13-cis Retinoic Acid

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1外消旋全反式4-羟基视黄酸质量规格：美国进口 rac all-trans 4-Hydroxy Retinoic Acid

KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a 人细胞裂解液 (阳性对照) 9-顺式视黄醇β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口9-cis Retinoyl β-D-Glucuronide

ACHN 人肾细胞腺癌细胞妥布霉素A质量规格：美国进口Tobramycin A
犬肾细胞系/野生型;MDCK/wildL-半胱胺酸盐酸盐无水物L-Cysteine ，anhydrous质量规格：>98%,BR

SEMA5A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 人细胞裂解液 (阳性对照) L-赖氨酸甲酯盐酸盐L-Lysine methyl ester di质量规格：0.98

人成纤维细胞完全培养基 100mLL-蛋氨酸甲酯盐酸盐L-Mine Methyl Ester 质量规格：>98%

C918细胞，人眼脉络色素瘤细胞 粪肠球菌(高耐) 正常小鼠Sertoli细胞;TM4胆硫酸酯钠盐 cholesteryl sulfate质量规格：>98%,BR

CCL16 Protein Human 重组人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 标签)O-叔丁基-L-丝氨酸甲酯盐酸盐O-tert-Butyl-L-serine methyl ester 质量规格：0.98
人膀胱基质成纤维细胞cDNAHBdSF cDNA氧化型辅酶Ⅰ100克

CTSB Others Mouse 小鼠 Cathepsin-B / CTSB 人细胞裂解液 (阳性对照) 录氮平 Clozcpinq 2786-1-0

3T3? 成纤维细胞天青II曙红 czurq II qosin 2309-82-6

CL-0255A875(人色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2聚乙二醇15005克

RLFs, 大鼠肺成纤维细胞Chlormequatchloride 100g/500g 国产
人角膜上皮细胞 (HcorF)( 5×105 )5-BrdC5-溴脱氧胞嘧啶核苷5克高，95%

CM-M090小鼠前脂肪细胞完全培养基100mL2-基务二晴 2-MqTHYLGLUTcROnitnILq 4223-6-

小鼠脑瘤细胞;BC3H1 小鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基 100mL3,5-Diiodo-L-tyrosinedihydrate3,5-二酪酸10克BR，98%

人间充质干细胞-脂肪 HumanSEPARATINGGEL,4XBUFFER蛋白分离胶缓冲液,4 X蛋白组学级500MLRT

RLN1 Others Human 人 RLN1 / Relaxin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4612-26-41，4-本二硼酸1,4-pxenylenepisboronic acid
PCR服务：
公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
副溶血性弧菌(VP)试剂盒荧光-PCR法（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

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