粪肠球菌（EF）试剂盒荧光-PCR法

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
储存条件：-20℃以下，有效期12个月。

产品名称：粪肠球菌（EF）试剂盒荧光-PCR法
产品货号：XG-R64023
规格：50T
分类：荧光-PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
应用案例：
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15]VPP烟酰胺5克高

ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACIIB / ACVR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) 十六1 1-Hqxcdqcqnq 69-73-

大额牛肾细胞;BFR-K1SDS-PAGE蛋白质高分子量shēng huà shì jì容量：1公斤

人肾系膜细胞 (HRMC)(1×106 )Tetracycline四环素碱1克BR，27U/mg

CL-0179P19(小鼠畸胎瘤细胞)5×106cells/瓶×2823-85-84-扶本盐酸盐4-Fluoropxenylhydr xy7nochloride
人B细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)D-亮氨酸甲酯盐酸盐D-Leucine methyl ester 质量规格：>98%(T)

人上皮细胞(HMEpiC) (5×105)L-缬氨酸L-Valine质量规格：>98%,BR

CM-H120人神经元细胞完全培养基100mLL-异亮氨酸(标准品)L-Isoleucine质量规格：HPLC≥98%，标准品

绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞;U14-GFP 小鼠肝星形细胞完全培养基 100mLL-异亮氨酸L-Isoleucine质量规格：>99%,BR

RN-h, 大鼠海马趾神经元 RattusL-苏氨酸L-Threonine质量规格：>99%,BR
VDR Others Human 人 VDR / NR1I1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 替拉替尼17-AAG质量规格：HSP90 抑制剂,BR,进分

CM-R086大鼠成纤维细胞完全培养基100mL盐酸特拉唑嗪Terazosin HCl质量规格：>98.5%,二水合物

Caki-1, 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 肌母细胞,L-6TG细胞 Cates-1B(人胚胎性癌细胞),素Testosterone 质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养

小鼠肺腺癌细胞系;LA795(标准品)Testosterone 质量规格：HPLC≥98%标准品

RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸丁卡因Tetracaine HCl质量规格：>98.5%,BR
人肾脏上皮细胞(HREpiC)( 5×105 ) MN-c, 小鼠皮质神经元 MouseCalcein3,3′-双(二乙酸)荧光素10克BR，0.02%

大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3化钕(III) Neodymium(III) chloride,≥99.99% 10024-93-8 1G 通用试剂

CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 肖醋钬·五水 Holmium(III) nitnctq pqntchydrctq 14483-18-

CL-0013A2780(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2Microcococcuslysodeikticuscells溶壁微球菌细胞100毫克BR，200u/g

KB细胞，人口腔表皮样癌细胞 人血管内皮细胞,VE细胞 大鼠肝癌细胞;RH-35538-74-9二苄基硫Dibenzyl sulphide
PCR服务：
公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
粪肠球菌（EF）试剂盒荧光-PCR法1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

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