储存条件： 仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清：使用不含热原和内**的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称
人黏附分子E-cad基因荧光PCR检测试剂盒
规格
50T
货号
XG-R64452
产品特点: 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断 灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因 特异性高：有效避免非特异性扩增的出现 稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强 扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
PCR实验方法步骤： 方法 1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix （2mM） 4 μl 引物1（10pM） 2 μl 引物2（10pM） 2 μl Taq酶 （2U/μl） 1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 实验过程： 一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 三、注意事项 １．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。 ２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。 ３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。 ４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤高压。 ５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。 ６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压。 ７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
检测步骤： 一、 试剂的准备 从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。 设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL （1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。 7.2 qPCR反应条件 将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。 推荐循环条件: 1循环 50℃ for 2 min 预变性 1循环 95℃ for 10 min PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec 在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
NGB 小鼠脑红蛋白ELISA检测试剂盒 NGB ELISA Kit GR 小鼠糖皮质类固醇受体ELISA检测试剂盒 GR ELISA Kit ON 小鼠骨粘连蛋白ELISA检测试剂盒 ON ELISA Kit FFA 小鼠游离脂肪酸ELISA检测试剂盒 FFA ELISA Kit ASMA 小鼠抗平滑肌抗体ELISA检测试剂盒 ASMA ELISA Kit AMA 小鼠抗单核细胞抗体ELISA检测试剂盒 AMA ELISA Kit Kim-1 小鼠肾损伤分子1ELISA检测试剂盒 Kim-1 ELISA Kit ICA 小鼠胰岛细胞抗体ELISA检测试剂盒 ICA ELISA Kit GSK 小鼠糖原合成酶激酶ELISA检测试剂盒 GSK ELISA Kit HK 小鼠己糖激酶ELISA检测试剂盒 HK ELISA Kit 250g 糊精 Dextrin 室温干燥避光保存 50T 大豆RR/SS PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存 250mL 考马斯亮蓝染液 Coomassie Blue G-250 Stain Solution 常温保存 人黏附分子E-cad基因荧光PCR检测试剂盒2 ug pBC-Hygro pBC-Hygro 低温运输，-20℃保存 1mg 天然蛋白A Native Protein A -20℃保存 2 ug pAAV-hrGFP pAAV-hrGFP 低温运输，-20℃保存 GVPC琼脂平板 GVPC Agar Plate 10个/包 1瓶 A172细胞株 A172 低温运输和保存 1个 15mLDNA超滤离心管(9-15KD) 100次 总肽检测试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存 125ML MES Lysis Buffer with Triton,2X MES Lysis Buffer with Triton,2X 常温保存