单抗原理:
WB抗体主要由B细胞合成。每个B细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B细胞系,含遗传基因不同的B细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个**一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
单抗制备过程:
1.提取合成专一性抗体的单个B细胞(不能在体外生长)。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B细胞融合,得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养,选出所需要的细胞群,并进行克隆化培养,得到稳定的杂交瘤细胞,再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯,一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。
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抗体的多样性:
抗体的组成极为复杂,是由成千上万、多种多样的球蛋白(Ig)分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上,既相似,又有差别。由于有差别,它们的电泳活性就有很大的变化。
因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位(抗原结合簇),所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面,抗体本身是一种蛋白质,具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构,对异种动物来说,它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性,它们表现出不同的血清学类型。
我司提供以下技术外包服务:
1.分子生物学:质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学:基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
2.蛋白工程:原核、哺乳动物蛋白表达系统等
3.病毒包装:腺病毒、慢病毒等
4.抗体工程:磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
5.细胞工程:细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)、细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术等等。
青霉(加词待译�� Lactobacillus plantarum
植物乳杆菌 Streptomyces malachitofuscus
孔雀(石)绿褐链霉菌仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断,非药用,非食用
虫草1-2 Kluyveromyces thermotolerans
耐热克鲁维酵母 Streptomyces lavendulae subsp. grasserius
浅紫灰链霉菌蚕脓亚种 Bacillus cereus
蜡样芽孢杆菌 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Actinokineospora terrae
土地放线动孢菌 Cunninghamella echinulata var. echinulata
孢小克银汉霉原变种 Newcastle disease virus
新城疫病 Bacillus thuringiensis
苏云金芽孢杆菌 Georgenia muralis
墙壁圣格奥尔根菌 Bacillus cereus
蜡状芽孢杆菌 Volvariella bombycina
丝盖小包脚菇仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断,非药用,非食用
镰刀菌 Bulleribasidium sanyaense
WB抗体a-包衬蛋白抗体2-(2-苯并噻唑) -3,5-二苯溴化四氮唑 2-(2-Benzothiazolyl)-3,5-diphenyltetrazolium Bromide >95.0%(T)Human
磷化突触融合蛋白1抗体2,3-二苯-5-(4-)化四氮唑 2,3-Diphenyl-5-(4-chlorophenyl)tetrazolium Chloride >92.0%(T)Human
线粒体内钙结合天冬氨/谷氨载体蛋白抗体1,5-二苯-3-(2-噻吩)臢 1,5-Diphenyl-3-(2-thienyl)formazanHuman
线粒体二羧载体蛋白11抗体2,3-二苯-5-(2-噻吩)化四氮唑 2,3-Diphenyl-5-(2-thienyl)tetrazolium Chloride >97.0%(LC&T)Human, Mouse
eIF4E结合蛋白2抗体2,3-二苯-5-(2-噻吩)化四氮唑 2,3-Diphenyl-5-(2-thienyl)tetrazolium Chloride >97.0%(LC&T)Human, Mouse, Rat
血清淀粉样蛋白P成份抗体2,3-二苯-5-乙化四氮唑 2,3-Diphenyl-5-ethyltetrazolium Chloride >98.0%(T)Human, Mouse
转录因子Sox3抗体2,3-二苯-5-化四氮唑 2,3-Diphenyl-5-methyltetrazolium ChlorideHuman, Mouse, Rat
神经颗粒蛋白5抗体1-(4-)-3--5-苯臢 1-(4-Nitrophenyl)-3-methyl-5-phenylformazan >98.0%(LC)Human, Mouse, Rat
突触结合蛋白11抗体3-(4-)-5--2-苯化四氮唑 3-(4-Nitrophenyl)-5-methyl-2-phenyltetrazolium Chloride >98.0%(LC)Human, Mouse, Rat
抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
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