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产品资料

RT-PCR试剂盒

RT-PCR试剂盒
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:RT-PCR试剂盒
  • 产品型号:FS-205641
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
RT-PCR试剂盒引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
产品描述

相对定量分析方法  :
2-ΔΔCt
前提:目标序列和内参序列的扩增效率接近100%且偏差在5%以内
 1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值:
   ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) 
   ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 
 2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值:
        ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
 3、计算表达水平比率:
                   2 –ΔΔCT=表达量的比值

参数规格:

产品名称:RT-PCR试剂盒
货号:FS-205641

使用方法:

一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

具有下列特点:
1.根据 指标的保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级,可以达到几百拷贝/反应。
3.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
4.一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6.本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的**离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、**双蒸水。

"20 μl ER-Tracker Red(内质网红色荧光探针) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
250 μg Fluo-3 AM(钙离子荧光探针) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1 mg Fluo-3,五铵盐 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1 mg Fura-2 AM(钙离子荧光探针) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
25 mg Fluorescein-5-maleimide Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1 mg Fura-2,五铵盐 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1 mg Golgi-Tracker Red(高尔基体红色荧光探针) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
10 mg Hydroxystilbamidine  Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1 mg Indo-1 AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1 mg Indo-1,五铵盐 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1 mg JC-1 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
5 mg JC-10 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
RT-PCR试剂盒 mg Lucigenin(光泽精) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
人 EGR2 基因全长ORF克隆
人 TCHP 基因全长ORF克隆
人 FSCN3 基因全长ORF克隆
人 CEP63 基因全长ORF克隆
人 FZR1 基因全长ORF克隆
人 GABRA3 基因全长ORF克隆
人 PPIL4 基因全长ORF克隆
人 ACBD5 基因全长ORF克隆
人 HSPBAP1 基因全长ORF克隆
人 PIGA 基因全长ORF克隆
人 RGS7 基因全长ORF克隆"

注意事项:
1. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。
2. 试剂Buffer AL若低温保存,易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀,混匀后再使用。
3. 电泳检测时,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则,电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。
4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率佳。
?5. 为了您的**和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作

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