PCR试剂盒

相对定量分析方法  ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
 1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
   ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
   ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
 2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
        ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
 3、计算表达水平比率：
                   2 –ΔΔCT=表达量的比值

参数规格：

产品名称：PCR试剂盒
货号：FS-205643

使用方法:

一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

具有下列特点：
1.根据 指标的保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级，可以达到几百拷贝/反应。
3.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
4.一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的**离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、**双蒸水。

"25 mg SPQ（6-甲氧基-N-（3-磺丙基）） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
25 mg TMRE Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
25 mg TSQ（6-甲氧基-（8-p-甲苯磺酰胺） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
5 mg Zinquin乙酯 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
40 μl Tubulin-Tracker Red（微管红色荧光探针） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
2 mg 1400W（iNOS抑制剂） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
1mL 5-Fluorouracil（5-氟脲嘧啶） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
20 μL Ac-DEVD-FMK（Caspase 3 Inhibitor） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
20 μL Ac-IETD-FMK（Caspase 8 Inhibitor） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
20 μL Ac-LEHD-FMK（Caspase 9 Inhibitor） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
1 mg  Actinomycin D（基因转录抑制剂） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
5 mg AG 490 （JAK抑制剂） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
PCR试剂盒5 mg AICAR （AMPK激活剂） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
人 FMO3 基因全长ORF克隆
人 CCDC9 基因全长ORF克隆
人 ATP5B 基因全长ORF克隆
人 GABRB1 基因全长ORF克隆
人 FOXA1 基因全长ORF克隆
人 SNX17 基因全长ORF克隆
人 CHRNA5 基因全长ORF克隆
人 SNX8 基因全长ORF克隆
人 FLAD1 基因全长ORF克隆
人 MAPKAP1 基因全长ORF克隆
人 TULP1 基因全长ORF克隆"