操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
服务:所有的检测试剂盒均免费代测,您只需要将您准备好的样本邮寄到我司即可!本地也可以上门收取样本!全程检测试剂盒实验技术指导,免费代做实验。本公司产品仅用于科研实验。老客户可享受优惠折扣服务!
产品名称
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elisa试剂盒质量
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货号
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96T/48T
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货号
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FS-205593
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产品名称:凝血因子Ⅷ试剂盒
货号:FS-016348
规格:96T/48T
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
"1g 溴甲酚绿 Bromocresol Green Sodium Salt 室温保存
5g 溴甲酚紫 Bromocresol Purple 室温保存
5g 溴酚蓝 Bromophenol Blue 室温干燥保存
5g 二甲基砷酸钠 Cacodylic Acid Sodium Salt 室温干燥保存
1g 丁酸钠 Butyric Acid Sodium Salt 室温干燥保存
100g 氯化钙,二水 Calcium Chloride, Dihydrate 室温干燥保存
1mg 钙离子载体 Calcium Ionophore A23187 室温避光保存
100mL 加拿大树胶 Canada Balsam 室温避光保存
10g 3-(环己胺)-1-丙磺酸 CAPS 室温干燥保存
1g Carbenicillin Disodium Salt 4℃保存
25mg 6- 羧基二乙酸荧光素 6-Carboxyflucrescein Diacetate -20℃保存
25g 羧甲基纤维素钠盐 Carboxymethylcellulose Sodium Salt 常温保存
1g 洋红 Carmine 室温干燥避光保存
人 H2AFV 基因全长ORF克隆
elisa试剂盒质量人 SUB1 基因全长ORF克隆
人 HIST1H2BK 基因全长ORF克隆
人 CRB3 基因全长ORF克隆
人 LYRM1 基因全长ORF克隆
人 MAP1LC3A 基因全长ORF克隆
人 ENSA 基因全长ORF克隆
人 VAMP2 基因全长ORF克隆
人 RBX1 基因全长ORF克隆
人 MCM6 基因全长ORF克隆
人 COX16 基因全长ORF克隆"
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