兔腹腔巨噬细胞
产品名称
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兔腹腔巨噬细胞
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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组织来源
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腹腔液
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生长特性
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贴壁
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细胞形态
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巨噬细胞样
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分类
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兔原代细胞
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货号
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A01X2078
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用途
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仅供科研实验
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培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 巨噬细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 利多卡因(12mM)
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
兔腹腔巨噬细胞分离自腹腔;腹腔,即躯干腹部的腔,内衬腹膜,由体壁、横膈膜和盆底围成,其内容纳胃、肝、胆囊、脾脏、胰、肾脏、肠、阑尾、膀胱、泌尿系和妇科(、附件)等其他内脏器官。巨噬细胞属细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞和分子学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性)和特异性防卫(细胞)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活球或其他细胞,令其对病原体作出反应。巨噬细胞功能及其在发生过程中的作用是目前研究的热点问题之一;腹腔巨噬细胞的吞噬、和分泌作用都十分活跃,有重要防御功能。
方法简介:
公司实验室分离的兔腹腔巨噬细胞采用反复往腹腔注射培养基并抽取的方法结合差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔腹腔巨噬细胞经CD68荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅��置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。
⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。
公司正在出售的产品:
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MAPK/ERK激酶3重组兔单克隆抗体
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Caspase recruitment domain 4; Caspase recruitment domain containing protein 4;
Caspase recruitment domain family member 4; Caspase recruitment domain protein
4; Caspase recruitment domain-containing protein 4; CLR 7.1; CLR7.1; NLR family
CARD domain containing 1; NLRC 1; NLRC1; NOD 1; Nod1; NOD1 protein; NOD1_HUMAN;
Nucleotide binding oligomerization domain containing 1; Nucleotide binding
oligomerization domain leucine rich repeat and CARD domain containing 1;
Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 1; Protein Nod1.
兔肝窦内皮细胞
小鼠颌下腺上皮细胞
OE19人食管细胞
EJ人膀胱癌细胞
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