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产品资料

兔肝外胆管上皮细胞

兔肝外胆管上皮细胞
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  • 产品名称:兔肝外胆管上皮细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
兔肝外胆管上皮细胞公司正在出售的产品:NCI-H1915人非小细胞肺癌细胞 核输出蛋白5抗体 MV IgM ELISA Kit 麻疹病毒检测试剂盒 干扰素诱导跨膜蛋白2抗体 人肺微血管内皮细胞;HPMVEC
产品描述
兔肝外胆管上皮细胞

产品名称

兔肝外胆管上皮细胞

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

组织来源

胆管

生长特性

贴壁

细胞形态

上皮细胞样

分类

原代细胞

货号

A01X2060

用途

仅供科研实验

培养信息:


包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2

培养基:含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:上皮细胞样

传代特性:可传1-2

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

兔肝外胆管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞简介:

兔肝外胆管上皮细胞分离自肝外胆管组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也**消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。临床上常见的胆管病变如胆道闭锁、先天性胆总管囊肿、原发性硬化性胆管炎等,都是以胆管上皮细胞为病变的靶位,引起胆管上皮的损伤。了解正常胆管上皮细胞的生物学特征和病变胆管上皮细胞的病理生理学特征对研究胆管病变的发病机制、诊断和具有重要意义。

方法简介

实验室分离的兔肝外胆管上皮细胞采用胶原酶灌注消化法后,再用胶原酶-DNA酶联合消化,接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中,通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肝外胆管上皮细胞经Cytokeratin-19荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

培养方法与步骤:

①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。

⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤


1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。

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