实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
兔冠状动脉内皮细胞分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。冠状动脉内皮细胞呈单层扁平分布，是一薄层的专门上皮细胞，它形成冠状动脉的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至小的微血管。
组织来源
产品规格
货号
用途
冠状动脉
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2025
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：内皮细胞样
传代特性：可传2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔冠状动脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介：
实验室分离的兔冠状动脉内皮细胞采用混合酶短暂消化后组织贴块、结合内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的兔冠状动脉内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
大鼠活化素B(ACV-B)elisa检测试剂盒
大鼠Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)elisa分析检测试剂盒
小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)elisa检测试剂盒
裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa分析检测试剂盒
冰冻切片中性脂质苏丹黑染色试剂盒
小鼠垂草扁桃酸(VMA)elisa检测试剂盒
大鼠C型钠尿肽（CNP）elisa检测试剂盒
M. gastri RFLP基因分析试剂盒
人B群链球菌多糖抗体(IgG)elisa检测试剂盒
线粒体钙离子单向转运蛋白MCU抗体 MCU
腺苷酸环化酶8抗体 ADCY8
癌胚抗原单克隆抗体（包被） CEA(C3)
白细胞介素-12受体β2抗体 IL12RB2
Cappuccino蛋白抗体 Cappuccino
CD8抗体 CD8
细胞趋化因子CCL21/Exodus 2抗体 CCL21
磷酸化IRE1蛋白抗体 phospho-IRE1 (Ser724)
重组蛋白G抗体 Protein G
转化生长因子β1/TGF β1/TGF-β1抗体 TGF beta 1
谷氨酸脱羧酶65+谷氨酸脱羧酶67抗体 GAD65 + GAD67
果蝇CG6856-PA抗体 CG6856-PA
MD-1蛋白抗体 MD1
NADH氧化还原酶辅酶1抗体 NDUFA1
溶血磷脂酸酰基转移酶β抗体 Agpat2
/通透性增强蛋白抗体 BPI
载玻片细胞ER BETA 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
兔冠状动脉内皮细胞大鼠重肽神经丝蛋白(NEFH)elisa检测试剂盒
通用型牛隐性炎基因检测试剂盒
IFN-AlphaG; INA5; INFA5; Interferon alpha-5; IFN-alpha-5; Interferon alpha-61; Interferon alpha 61; Interferon alpha G; Interferon alpha-G; interferon, alpha 5; LeIF G; IFNA5_HUMAN.
兔冠状动脉平滑肌细胞
小鼠骨膜干细胞
QGY-7701人肝癌细胞
GCIY人胃癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；