实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
兔海绵体平滑肌细胞分离自海绵体组织；海绵体，又称海绵体肌，是硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织，外面包有坚厚的白膜，内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架，其腔隙与血管相通。它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。因此可用胶原酶分离出海绵体平滑肌细胞。平滑肌，是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
组织来源
产品规格
货号
用途
海绵体
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2115
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔海绵体平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介：
实验室分离的兔海绵体平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的兔海绵体平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
食物果胶化学比色法定量检测试剂盒
体液基质金属（MMP-12）活性比色法定量检测试剂盒
人补体片段3b受体(C3bR)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠蛋白激酶C PKC elisa检测试剂盒
小鼠载脂蛋白A2(APOA2)elisa检测试剂盒
小鼠胆固醇(CH)elisa分析检测试剂盒
大鼠I型胶原(COL1)elisa分析检测试剂盒
TEM电镜石蜡切片组织化学HRP酶联DAB完全间接检测试剂盒
人CD8分子(CD8)elisa检测试剂盒
妊娠特异性糖蛋白4抗体 PSG4
溶质载体转运蛋白家族30成员5抗体 SLC30A5
KIAA1107蛋白抗体 KIAA1107
LRRFIP2蛋白抗体 LRRFIP2
脂肪细胞膜相关蛋白抗体 APMAP
肿瘤坏死因子α诱导相互作用蛋白3抗体 TNFAIP3 interacting protein 3
肝癌易感蛋白3抗体 PSMG2/HCCA3
高密度脂蛋白受体/清道夫受体重组兔单克隆抗体 SCARB1/Scavenger Receptor BI
细胞周期蛋白N端结构域蛋白1抗体 CNTD
线粒体核糖体蛋白L39 MrpL39
β淀粉样肽1-28单克隆抗体 beta-Amyloid (1-28)
艾滋病病毒p24抗体 HIV1 p24
Bcl-2结合抑凋亡蛋白2抗体 BAG2
CD163蛋白样1抗体 CD163L1
激酶A/B/C抗体 Trk A + B + C
磷酸化HOMER3蛋白抗体 phospho-HOMER3 (Thr36)
小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)elisa检测试剂盒
兔海绵体平滑肌细胞大鼠apelin 13(AP13)elisa检测试剂盒
人体PR-A基因甲基化检测试剂盒-货
C ets 2 protein; ETS2; ETS2_HUMAN; Oncogene ETS2; Protein C-ets-2; V ets erythroblastosis virus E26 oncogene homolog 2.
兔颌下腺上皮细胞
小鼠股骨头微血管内皮细胞
RKO人结肠腺癌细胞
GH3(垂体瘤细胞)
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；