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产品资料

兔腮腺细胞

兔腮腺细胞
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  • 产品名称:兔腮腺细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
兔腮腺细胞公司正在出售的产品:NCI-H446人小细胞肺癌细胞 6号染色体开放阅读框15抗体 CT antibody IgG ELISA Kit 沙眼衣原体抗体检测试剂盒 1号染色体开放阅读框63抗体 人鼻粘膜上皮细胞;HNEpC
产品描述
兔腮腺细胞

产品名称

兔腮腺细胞

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

组织来源

腮腺

生长特性

贴壁

细胞形态

梭形、多角形

分类

原代细胞

货号

A01X2112

用途

仅供科研实验

培养信息:


培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:梭形、多角形

传代特性:可传1-2代

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%

兔腮腺细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞简介:

兔腮腺细胞分离自腮腺组织;腮腺是哺乳类动物口腔中位于下颌角处的大唾液腺,位于外耳道的前下方,下颌后窝内及下颌支的深面。腮腺也是某些无尾目动物颈部有毒皮肤腺的聚集体;唾液腺有3对,腮腺、舌下腺和颌下腺,其中大的一对是腮腺。腮腺细胞是高度分化的上皮源性细胞,是一种营养需要复杂、在一般合成培养基中不易生长,体外培养比较困难。目前,DMEM培养液被认为较适于腺细胞的培养。加入一定量的血清更有利于细胞的生长、增殖与分化。另外,接种的细胞密度也是培养成功的关键因素之一,尤其是在腺细胞这种单层细胞培养时,接种的细胞总数量和生长基质表面的细胞密度对整个细胞的生长均有影响。

方法简介

实验室分离的兔腮腺细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化后差速贴壁,结合上皮细胞培养基培养筛选制备而来,总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔腮腺细胞经PCK荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。

培养方法与步骤:

①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管���缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。

⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤


1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。

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