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产品资料

兔三叉神经星形胶质细胞

兔三叉神经星形胶质细胞
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  • 产品名称:兔三叉神经星形胶质细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
兔三叉神经星形胶质细胞公司正在出售的产品:NCI-H460 [H460] 人大细胞肺癌细胞 9号染色体开放阅读框117抗体 Hyp ELISA Kit 羟脯氨酸检测试剂盒 22号染色体开放阅读框45抗体 人鼻咽癌细胞+luc;CNE2-LUC-PURO
产品描述
兔三叉神经星形胶质细胞

产品名称

兔三叉神经星形胶质细胞

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

组织来源

生长特性

贴壁

细胞形态

梭形、多角形

分类

原代细胞

货号

A01X2207

用途

仅供科研实验


培养信息:


培养基:含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:梭形、多角形

传代特性:可传3代左右

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

兔三叉神经星形胶质细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞简介:

兔三叉神经星形胶质细胞分离自三叉神经组织;三叉神经为粗大的混合性脑神经,含一般躯体感觉和特殊内脏运动两种纤维。其特殊内脏运动纤维起于脑桥中段的三叉神经运动核,纤维组成三叉神经运动根,由脑桥基底部与脑桥臂交界处出脑,位于感觉根下内侧,后进入三叉神经第3支下颌神经中,经卵圆孔出颅,随下颌神经分支分布于咀嚼肌等。运动根内还含有三叉神经中脑核有关的纤维,主要传导咀嚼肌的本体感觉。三叉神经内以躯体感觉神经纤维为主,这些纤维的细胞体位于三叉神经节(半月节)内,该神经节位于颅中窝颧骨岩部的前面三叉神经压迹处,为硬脑膜形成的美克尔腔包裹。神经胶质细胞是神经组织中除神经元以外的另一大类细胞,也有突起,但无树突和轴突之分,广泛分布于和周围神经系统。在哺乳类动物中,神经胶质细胞与神经元的细胞数量比例约为101。在神经系统(CNS)中的神经胶质细胞主要有星形胶质细胞、少突胶质细胞(与前者合称为大胶质细胞)和小胶质细胞等。传统认为胶质细胞属于结缔组织,其作用仅是连接和支持各种神经成分,其实神经胶质还起着分配营养物质、参与修复和吞噬的作用,在形态、化学特征和胚胎起源上都不同于普通结缔组织。星形胶质前体细胞主要表达Vimentin,而成熟之后表达Vimentin和胶质纤维酸性蛋白(GFAP),故GFAP被认为是星形胶质细胞成熟的标志物。

方法简介

实验室分离的兔三叉神经星形胶质细胞采用胰蛋白酶消化法结合差速贴壁法筛选制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔三叉神经星形胶质细胞经GFAP荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

培养方法与步骤:

①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。

⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤


1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。

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