实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
兔肾上腺皮质细胞分离自肾上腺组织;肾上腺是机体相当重要的器官,由于位于两侧肾脏的上方,故名肾上腺。肾上腺左右各一,位于肾的上方,共同为肾筋膜和脂肪组织所包裹。左肾上腺呈半月形,右肾上腺为三角形。从侧面观察,腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分,周围部分是皮质,内部是髓质。肾上腺内部是髓质部分,分泌肾上腺素和。这些在应激状态释放增多,能够帮助升高血压,加快心率,升高血糖,动员全身的储备物质,为机体与外界环境的抗争作好充分准备。肾上腺外部是皮质部分,分泌醛固酮、皮质醇和少量的雌雄。醛固酮能够促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收,正常数量的醛固酮,对维持机体正常血压有重要作用。但是如果过多分泌,会导致高血压和低血钾。皮质醇是机体必需的之一。当机体处于应激状态时,比如感冒,发烧,遇到突发事件的时候,肾上腺皮质分泌大量的皮质醇,这些皮质醇能够动员机体的存储能源,为应对内部或者外部重要事件提供充分的物质准备。当皮质醇缺乏时,机体在遇到重大事件的时候,往往缺乏足够应对能力,容易被病毒或外界压力所击倒。肾上腺产生的雄,对雄性来讲,并非,但是对雌性而言,是雄的一个重要来源。
组织来源
产品规格
货号
用途
肾上腺
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2107
仅供科研研究实验
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传1-3代左右;2代以内状态佳
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肾上腺皮质细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介:
实验室分离的兔肾上腺皮质细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔肾上腺皮质细胞经3β-HSD荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
大鼠神经营养因子3(NT-3)elisa检测试剂盒
大鼠白介素12(IL-12/P70)elisa分析检测试剂盒
小鼠三磷酸腺苷(ATP)elisa检测试剂盒
人Igγ3链C区(IGHG3)elisa检测试剂盒
细胞PAK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
小鼠肌酐(Cr)elisa分析检测试剂盒
大鼠补体C3a(C3a)elisa检测试剂盒
石蜡切片脂肪酸费斯克勒(Fischler)直接染色试剂盒
人白介素19(IL-19)elisa检测试剂盒
人巨细胞病毒单克隆抗体 HCMV(1F11)
溶质载体家族25成员39抗体 SLC25A39
KCTD4蛋白抗体 KCTD4
LARP4B蛋白抗体 LARP4B/LARP5
整合素相关蛋白CD47重组兔单克隆抗体 CD47
中心体蛋白CEP120抗体 CEP120
甘氨酸-N-甲基转移酶抗体 GNMT
干扰素调节因子7重组兔单克隆抗体 IRF7
细胞纤毛内转运源蛋白20抗体 IFT20
酰硫酯酶蛋白2抗体 LYPLA2
α-甘露糖苷酶2x抗体 MAN2A2
γ-衔接蛋白相关蛋白2抗体 GGA2
ATP依赖解螺旋酶ETL1抗体 SMARCAD1
B细胞白血病前体蛋白转录因子3抗体 PBX3
辣根过氧化物酶标记的小鼠抗Human IgE单克隆抗体 Anti-Human IgE / HRP
磷酸化S6核糖体蛋白(Ser240/244)抗体 Phospho-RPS6 (Ser240 + Ser244)
活体细胞组织L(CATHEPSIN L)活性原位荧光染色检测试剂盒
兔肾上腺皮质细胞内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa检测试剂盒
Bradford 蛋白定量试剂盒250T
Alzheimer disease amyloid associated protein; AMY; CLAC; CLAC P; CLAC precursor; COL25A1; COL25A1 protein; Collagen alpha 1 XXV chain; Collagen alpha 1(XXV) chain; Collagen like Alzheimer amyloid plaque component; Collagen like Alzheimer amyloid plaque component precursor; Collagen type XXV alpha 1; Collagenous Alzheimer amyloid plaque component.
兔肾小管上皮细胞
小鼠鼻腔粘膜上皮细胞
SW982 [SW-982]人滑膜肉瘤细胞
HCT116人结肠癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;