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产品资料

兔肾小管上皮细胞

兔肾小管上皮细胞
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  • 产品名称:兔肾小管上皮细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
兔肾小管上皮细胞公司正在出售的产品:NCI-H520人肺鳞癌细胞 Fas活化激酶结构域蛋白1抗体 RARS ELISA Kit 精氨酰检测试剂盒 C-SKI抗体 人白血病细胞;JJN3
产品描述
兔肾小管上皮细胞

细胞简介:


兔肾小管上皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是**尿液,借以体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有功能,**肾素、促红细胞**素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分的降解场所和肾外的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分;近端小管可分为直部和曲部,曲部也称为近曲小管,位于皮质迷路内,于肾小体附近高度蟠曲;远端小管曲部也称为远曲小管,位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞,肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏的一项重要技术,目前该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能:①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非营养物质进入终尿;③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子,通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应;④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2RMHC-Ⅱ类抗原,这说明肾小管上皮细胞参与肾损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深,肾小管上皮细胞(RTECs)在其中的作用日益被人们重视。因此,提供良好的肾小管上皮细胞模型,在肾小管间质的发病机制和筛选的研究中是非常重要的。

组织来源

产品规格

货号

用途

5×105cells/T25细胞培养瓶

A01X2079

仅供科研研究实验

培养信息:

包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2

培养基:含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:上皮细胞样

传代特性:可传1-2

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

兔肾小管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

方法简介

实验室分离的兔肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化,结合上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肾小管上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

实验具体步骤:


(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净;
(3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中;
(4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,

利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)

(6)种植组织块:将上述组织使用2X双抗冰冷PBS洗涤3次,每次5min,然后使用完全培养基(含有1X双抗)洗涤一次。经过的心脏破碎组织块经过离心后,可以用细头

镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的
盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);


(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;

(8)贴壁细胞传代:当单个细胞从组织块爬出面积在组织块3-5倍,进行传代,此时可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化组织块爬出的细胞,消化时间根据正常细胞消化时间即可,当然可以在消化过程中不断管擦爬出细胞的皱缩情况,一旦达到消化完成(皱缩细胞≥70%)即可使用完全培养基终止消化。在吹打单个细胞时候,一定要轻柔/缓慢,不能吹打到组织块,如果组织块掉下来,大概率是不会再贴壁成功啦。

根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;

(9)鉴定:细胞在传代至代、第五代、第十代时候可以将部分细胞进行鉴定,鉴定办法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式细胞术等。

实验方法:

一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。

公司正在出售的产品:


Toll样受体4(TLR4)elisa分析检测试剂盒

MITD1蛋白抗体

MITD1

1号染色体开放阅读框31抗体

C1orf31

小鼠饥饿(GHRL)elisa分析检测试剂盒

大鼠补体C5aC5aelisa检测试剂盒

细胞磷脂皮尔斯(Pearse)染色试剂盒

人白介素18结合蛋白(IL-18BP)elisa检测试剂盒

磷脂爬行酶3抗体

PLSCR3

皮肤T细胞虏获趋化因子抗体

CCL27

转录因子Tbx3抗体  Anti-TBX3

腺苷单磷酸活化蛋白激酶γ2抗体  Anti-PRKAG2/AMPKγ2

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶18  Anti-PLK4/STK18

钠碘转运体蛋白8抗体  Anti-SLC5A8

Cy5标记的兔抗人IgG H&L F(ab')2

Rabbit Anti-Human IgG F(ab') / Cy5

减数分裂内切酶EME1抗体

EME1

人白介素17F(IL-17F)elisa分析检测试剂盒

IL-17FELISAKit

猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析检测试剂盒

PorcineOsteocalcinELISAkit

猴子N端前脑钠素(NT-proBNP)elisa分析检测试剂盒

兔肾小管上皮细胞NT-proBNP ELISA KIT

人肺耐药蛋白(LRP)elisa分析检测试剂盒

ELAV (embryonic lethal abnormal vision Drosophila) like 3; ELAV-like protein 3 isoform 1; ELAV-like protein 3; Hu antigen C; ELAV like protein 3; ELAVL3; Hu antigen C; HUC; HUCL; Paraneoplastic cerebellar degeneration associated antigen; Paraneoplastic limbic encephalitis antigen 21; DKFZp547J036; MGC20653; PLE21; ELAV3_HUMAN.

兔视网膜色素上皮细胞

小鼠背根神经节细胞

T24人膀胱移行细胞癌细胞

HCT-116人结肠癌细胞


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