实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
兔牙龈上皮细胞分离自牙龈组织;牙龈是附着在牙颈和牙槽突部分的粘膜组织,呈粉红色、有光泽、质坚韧。牙龈边缘称为龈缘,正常呈月芽形。龈缘与牙颈之间的小沟称龈沟。两邻牙之间的牙龈突起称龈乳突。也叫齿龈,通称牙床;是指包住齿颈的黏膜组织,粉红色,内有很多血管和神经。牙龈上皮长期被认为是抵御口腔中持续存在的的被动屏障,随着对牙周致病菌的不断认识,发现牙龈上皮不仅仅是抵御微生物的物理屏障,上皮细胞还可以分泌多肽,参与先天性。牙龈上皮作为牙周组织的道屏障,在抵御牙周炎入侵的过程中发挥了重要作用,建立正常牙龈上皮细胞体外培养体系,将为各种牙龈上皮相关的研究提供稳定的实验模型。
组织来源
产品规格
货号
用途
牙龈
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2236
仅供科研研究实验
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔牙龈上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介:
实验室分离的兔牙龈上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔牙龈上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
柠檬酸CA含量测试盒 50T/48样 比色法
大鼠细胞色素P450 1A1(CYP1A1)elisa检测试剂盒
DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒
豚鼠白介素10(IL-10)elisa检测试剂盒
饮料糖精(saccharin)含量薄层色谱法定性检测试剂盒
小鼠抗内膜抗体(EMAb)elisa检测试剂盒
大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)elisa检测试剂盒
组织a-(a-AMYLASE)活性比色法定量检测试剂盒
人带3蛋白(Band3)elisa分析检测试剂盒
中心粒周蛋白抗体 PCNT
肿瘤抑制基因P53蛋白抗体 human P53
干扰素α8抗体 Interferon alpha 8
谷氨酸草酰乙酸转氨酶1样蛋白1抗体 GOT1L1
KPNA5蛋白抗体 KPNA5
MAPK/ERK激酶激酶15抗体 MAP3K15
热休克蛋白104抗体 Hsp104
绒毛膜绒毛体催乳素样蛋白1抗体 CSHL1
BTB/POZ结构域蛋白10抗体 BTBD10
CD3G重组兔单克隆抗体 CD3G
立即早期癌基因BRLF1/鼻咽癌基因抗体 BRLF1
磷酸化cyclin D1抗体 Phospho-Cyclin D1 (Thr286)
γ-谷氨酰水解酶抗体 GGH
白介素1β/IL-1β抗体 IL-1 Beta
细胞色素P450 2B1抗体 Cytochrome P450 2B1
线粒体核糖核酸酶P蛋白3抗体 MRPP3
GMS10
兔牙龈上皮细胞人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)elisa分析检测试剂盒
大鼠果糖胺(FRA)elisa检测试剂盒
7TM receptor; Acetylcholine receptor, muscarinic, 2; Acm2; Cholinergic receptor muscarinic 2; Cholinergic receptor, muscarinic 2, cardiac; Cholinergic receptor, muscarinic 2, isoform a; Cholinergic receptor, muscarinic 2a; Cholinergic receptor, muscarinic 2, isoform a; CHRM 2; chrm2a; CM2; FLJ43243; HM 2; HM2; M2; M2 muscarinic receptor; MGC120006; MGC120007; ACM2_HUMAN; Muscarinic acetylcholine receptor M2; Muscarinic M2 receptor; Acetylcholine receptor(M2).
兔牙周膜成纤维细胞
小鼠
HFL1人肺成纤维细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;