实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
兔胰岛细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%,每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规产生的严重低血糖症状,具有创伤小及并发症少等优点,是有前景的Ⅰ型糖尿病方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤,分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。
组织来源
产品规格
货号
用途
胰腺
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2102
仅供科研研究实验
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔胰岛细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介:
实验室分离的兔胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔胰岛细胞经DTZ染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
细胞凋亡诱导(DNA酶抑制)试剂盒
小鼠热休克转录因子4(HSF4)elisa检测试剂盒
大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)elisa检测试剂盒
细胞基质金属(MMP-7)活性荧光定量检测试剂盒
人分泌型球蛋白A(SIgA)elisa分析检测试剂盒
小鼠细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)elisa检测试剂盒
大鼠肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)elisa分析检测试剂盒
组织NADPH还原酶(NADPH Cytochrome C Reductase)活性
人的牛血清白蛋白(BSA)elisa分析检测试剂盒
BCL2相互作用蛋白质抗体 Hrk
CD20单克隆抗体 CD20
磷酸酶受体相互作用蛋白Liprin α1抗体 Liprin alpha 1
磷酸二酯酶8A抗体 PDE8A
β-肌动蛋白/β-Actin(内参)抗体 beta-Actin (Loading Control)
氨基末端激酶1/3抗体 JNK1 + JNK3
细胞色素B5结构域蛋白1抗体 CYB5D1
细胞信号转导分子SMAD3重组兔单克隆抗体 Smad3
LNP1蛋白抗体 LNP1
MGAT4C蛋白抗体 MGAT4C
人k轻链单克隆抗体 Human Ig Kappa light chain
溶质载体家族22成员4抗体 SLC22A4
高尔基体膜蛋白抗体 GOLPH4
谷胱甘肽S转移酶ζ1抗体 Glutathione Transferase zeta 1
整合素αX抗体 CD11c
周期素依赖性激酶7重组兔单克隆抗体 Cdk7
人6酮前列腺素(6-K-PG)elisa检测试剂盒免费代测
兔胰岛细胞组织钠离子(Na)浓度荧光定量检测试剂盒
小鼠高尔基蛋白73(GP73)elisa检测试剂盒
Ifi-6-16; IFI6; IFI6_HUMAN; Interferon alpha-inducible protein 6; Interferon-induced protein 6-16.
兔胰腺导管上皮细胞
兔雪旺细胞
AML-12小鼠肝实质细胞
HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;