兔胰腺星状细胞
产品名称
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兔胰腺星状细胞
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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组织来源
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胰腺组织
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生长特性
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贴壁
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细胞形态
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成纤维细胞样
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分类
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兔原代细胞
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货号
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A01X2101
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用途
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仅供科研实验
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培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
兔胰腺星状细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星状细胞(PSC)是胰腺纤维化的主要效应细胞,PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴,并表达Desmin蛋白,活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA)。PSC具有静息态与激活态两种,并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色,阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现,原代分离的细胞培养6d,胞浆中仍可见明显的脂滴,传代后,橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。细胞化学染色显示,细胞接种24h仍然表达Desmin,48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA,随着培养时间的增长和传代次数的增加,细胞表达alpha-SMA,而不再表达Desmin,说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程,至培养第6d大多数细胞激活,传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型,目前研究发现:胰腺受损时,在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化,导致细胞形态、功能发生变化,促使基质增生、胶原蛋白的大量**及不规则沉积��
方法简介:
公司实验室分离的兔胰腺星状细胞采用胶原酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔胰腺星状细胞经α-SMA、Desmin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。
⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。
公司正在出售的产品:
大鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)elisa检测试剂盒
大鼠B细胞瘤因子2(Bcl-2)elisa检测试剂盒
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa检测试剂盒
牛白介素8(IL-8)elisa检测试剂盒
体液单胺氧化酶A型(MAO-A)活性化学发光法定量检测试剂盒
小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)elisa检测试剂盒
大鼠分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)elisa检测试剂盒
植物β1,3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量检测试剂盒
人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)elisa分析检测试剂盒
EPB41L4A蛋白抗体 EPB41L4A
FAM26E蛋白抗体 FAM26E
磷酸化外纺锤体极样蛋白1抗体 phospho-Separase (Ser1073)
磷酸化整合素β1(CD29)抗体 phospho-Integrin beta 1 (Tyr783)
促卵泡刺受体抗体 FSH receptor
蛋白激酶A2抗体 AKAP2/PALM2
锌指蛋白449抗体 ZNF449
锌指蛋白787抗体 ZNF787
PE标记人CD11c单克隆抗体 human CD11c/PE
PHD指蛋白21A抗体 PHF21A
视黄醛结合蛋白1抗体 RLBP1L1
瞬时受体电位蛋白12抗体 TRP12/TRPV4
环指蛋白31抗体 RNF31
肌浆/内质网钙ATP酶2抗体 Serca2/SERCA2 ATPase
组蛋白H1.2重组兔单克隆抗体 Histone H1.2
19号染色体开放阅读框61抗体 C19orf61
载玻片细胞线粒体复合物III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
兔胰腺星状细胞甲醛固定组织蛋白提取试剂盒50T
咖啡甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
Pectinesterase/pectinesterase
inhibitor 18; AtPMEpcrA; Contains: Pectinesterase inhibitor 18; Pectin
methylesterase inhibitor 18; Contains: Bifunctional pectinesterase 18/rRNA
N-glycosylase; PE 18; Pectin methylesterase 18; Pectin methylesterase 4;
AtPME4. 黑曲霉果胶酶;
兔真皮毛细胞
兔嗅鞘细胞
AtT-20小鼠垂体瘤细胞
HL 60(hl-60)人早幼粒白血病细胞
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