实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能**红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括、病毒等；某些细胞能**抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化，因此可以作为组织工程中的种子细胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核细胞总数的0.001%-0.1%，含量极低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高，在培养过程中，受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。
组织来源
产品规格
货号
用途
骨髓
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1909
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠骨髓间充质干细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠骨髓间充质干细胞经CD29、CD44荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
ADMAELISAKit
植物过氧化氢酶2(CAT2/CAT)elisa分析检测试剂盒
CAT2/CAT ELISA kit
人促甲状腺素受体(TSHR)elisa分析检测试剂盒
HumanTSHRELISAKit
植物线粒体膜蛋白提取试剂盒50T
大鼠肌酸激酶工酶MB(CK-MB)elisa检测试剂盒
组织RSK2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
人基质金属蛋白酶10(MMP-10)elisa分析检测试剂盒
KIAA1462蛋白抗体
KIAA1462
卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD8抗体
CHCHD8
雌二醇(E2)elisa检测试剂盒
植物细胞可溶性总核蛋白高纯制备试剂盒
通用型DNA氧化损伤AP位点比色法定量分析试剂盒
含L谷氨酰胺 500ml
RSPO2蛋白抗体
RSPO2
头发角蛋白32抗体
KRT32
小泛素相关修饰蛋白1抗体 Anti-SENP1
多囊肾蛋白1样3抗体 Anti-PKD1L3
piwi样4蛋白抗体 Anti-PIWIL4
泛素激活酶2（泛素激活酶E1相关蛋白抗体） Anti-Ube1L/UBE2
鼠抗人IgG H&L单克隆抗体
小鼠骨髓间充质干细胞Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb
高尔基体卷曲螺旋蛋白2抗体
subfamily M subunit alpha-1; BK channel; BKCA alpha; BKCA alpha subunit; BKTM; Calcium-activated potassium channel; Calcium-activated potassium channel subunit alpha-1; Drosophila slowpoke like; hSlo; K(VCA)alpha; KCa1.1; KCMA1_HUMAN; KCNMA; KCNMA1; Maxi K channel; Maxi Potassium channel alpha; MaxiK; SAKCA; SLO alpha; SLO; Slo homolog; Slo-alpha; Slo1; Slowpoke homolog.
小鼠骨细胞
兔室管膜细胞
L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞
HT-1080人纤维肉瘤细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；