实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠海马神经元细胞分离自海马体；海马体(Hippocampus)，又名海马回、海马区、大脑海马，海马体主要负责记忆和学习。海马神经元细胞是海马区的主要细胞组成，主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等的主要病灶之一。海马属于大脑的边缘系统，在学习、记忆、情绪反应及神经系统的病理生理变化等方面有重要作用，而且海马组织是神经系统内主要的神经干细胞聚集区，具有高度序化板层结构和神经元相对独立分布的特点，境界相对清晰，便于取材，因此，海马神经元体外培养模型被广大基础医学和临床医学研究者当做理想的实验模型。海马神经元细胞培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用(细胞因子)的有效细胞模型，其在神经生物学，发育生物学体外实验研究中已被广泛应用。
组织来源
产品规格
货号
用途
脑海马体
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1948
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml）
培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠海马神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、神经元培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠海马神经元细胞经β-Tubulin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
土壤α-葡萄糖苷酶（S-α - GC）测试盒
人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)elisa分析检测试剂盒
细胞组织B（CATHEPSIN B）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠络丝蛋白(RL)elisa检测试剂盒
大鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)elisa检测试剂盒
小鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员13(TNFSF13)elisa检测试剂盒
大鼠激肽原(KNG)elisa分析检测试剂盒
组织SYK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
人抗精子抗体（AsAb）elisa检测试剂盒
AF750标记的白介素1β抗体 IL-1 Beta, Alexa Fluor 750 conjugated
APC-Cy7标记人CD25单克隆抗体 human CD25/APC-Cy7
精子发生相关蛋白9抗体 SPATA9
卷曲螺旋结构域蛋白92抗体 CCDC92
TBC结构域家族D4蛋白抗体 phospho-TBC1D4 (Ser588)
T细胞易位蛋白2抗体 LMO2
唾液酸糖蛋白受体1抗体 ASGPR1
味觉受体蛋白家族2亚基5抗体 TAS2R5
HEAT重复内含蛋白1蛋白抗体 HEATR1
IQCK蛋白抗体 IQCK
配体依赖核受体共抑制因子抗体 MLR2
桥粒斑菲素蛋白4抗体 Plakophilin 4
富含半胱氨酸蛋白质MIG7抗体 MIG7
钙结合蛋白D28K重组兔单克隆抗体 Calbindin
抑癌蛋白TCHP抗体 TCHP
增强型黄色荧光蛋白单克隆抗体 EYFP
大鼠E3-RSIκB elisa分析检测试剂盒
小鼠海马神经元细胞小鼠防御素α1(DEFα1)elisa检测试剂盒
大鼠elisa分析检测试剂盒
Cadherin 6; Cadherin6; Cadherin-6; Cadherin 6 type 2; Cadherin fetal kidney; Cadherin6; CDH 6; CDH6; KCAD; Kidney cadherin; CADH6_HUMAN.
小鼠海绵体内皮细胞
兔视网膜神经节细胞
M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞
HT29 gluc C1白种人结肠腺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；