细胞简介:
小鼠海绵体内皮细胞分离自海绵体组织;海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构,它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中,而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面,仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时,胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系,破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大,平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来,从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此,比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键。
组织来源
产品规格
货号
用途
海绵体组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1885
仅供科研研究实验
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的小鼠海绵体内皮细胞采用混合酶消化法结合机械分离法、并用内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠海绵体内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死; (2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
大鼠表面活性物质关联蛋白A(SPA)elisa检测试剂盒
Arf1鸟苷酸酶活性分析试剂盒
小鼠白介素2(IL-2)elisa检测试剂盒
大鼠转化生长因子β1受体(TGF-β1R)elisa检测试剂盒
线粒体复合物IV蛋白表达西方杂交分析试剂盒
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)elisa分析检测试剂盒
大鼠激肽原(KNG)elisa检测试剂盒
组织RSE激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)elisa分析检测试剂盒
BCL2样10促凋亡蛋白抗体 BCL2L10
CD20抗体 CD20
磷酸酶受体相互作用蛋白Liprin α2抗体 Liprin alpha 2
磷酸二酯酶8B抗体 PDE8B
β晶体蛋白B1抗体 beta B1 Crystallin
氨基末端激酶2抗体 JNK2/MAPK9
细胞色素b5抗体 Cytochrome b5
细胞信号转导分子SMAD5 重组兔单克隆抗体 Smad5
LNX2蛋白抗体 LNX2
MGAT5B蛋白抗体 MGAT5B
人k轻链重组兔单克隆抗体 Human Ig Kappa light chain
溶质载体家族23成员1抗体 SLC23A1
高尔基体膜相关蛋白5单克隆抗体 GOLGA5
谷胱甘肽S转移酶θ/Glutathione S Transferase theta 1抗体 GSTT1
整合素β1(CD29)抗体 Integrin beta 1
重组兔脂肪酸合成酶单克隆抗体 Fatty Acid Synthase
CHROMOMYCIN A3细胞核形态染色试剂盒
小鼠海绵体内皮细胞大鼠肾酶(RNLS)elisa检测试剂盒
果蝇细胞冻存试剂盒
Antiluteolysin; IFN-epsilon; IFNE; IFNE_HUMAN; IFNT1; Interferon epsilon 1; Interferon epsilon; Interferon epsilon-1; Interferon tau 1; OTP; TP1; Trophoblastin.
小鼠海绵体平滑肌细胞
兔视网膜色素上皮细胞
MA-891小鼠乳腺癌高转移细胞
HT-29人结肠癌细胞