实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠滑膜间充质干细胞分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎（OA）以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型（巨噬样滑膜细胞）、B型（成纤维样滑膜细胞）以及C型（树突细胞样滑膜细胞）细胞组成。滑膜细胞主要功能：①滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
组织来源
产品规格
货号
用途
滑膜组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1911
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠滑膜间充质干细胞采用胶原酶消化法和低密度接种法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠滑膜间充质干细胞经CD29、CD44荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
NF-LELISAkit
大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)elisa分析检测试剂盒
cPLA2 ELISA Kit
人基质裂解蛋白/基质溶素(MAT)elisa分析检测试剂盒
MATELISAKit
小鼠糖原磷酸化酶工酶BB(GP-BB)elisa检测试剂盒
��鼠接触蛋白4(CNTN4)elisa检测试剂盒
细胞磷酸二酯酶3（PDE3）活性荧光定量检测试剂盒
人沙眼衣原体蛋白酶样活性因子（CPAF）elisa检测试剂盒
鱼热休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)elisa分析检测试剂盒
HSP90AA1 ELISA kit
人超磷酸化微管相关蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)elisa分析检测试剂盒
HumanhyperphosphorylatedMAPTELISAkit
人烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）elisa检测试剂盒
蜂蜜海藻糖比色法定量检测试剂盒
线粒体膜蛋白提取试剂盒100T
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)elisa检测试剂盒
NDUFB9蛋白抗体
NDUFB9
生长休止特定蛋白2抗体
GAS2
动力蛋白轻链 Anti-TCTEL1/DYNLT1
神经细胞凋亡调节转化蛋白1抗体（前蛋白转化酶枯草溶菌素9） Anti-PCSK9/NARC1
耳聋、常染色体隐性遗传22抗体 Anti-OTOA/DFNB22
5-羟色胺/5羟色胺抗体 Anti-5-HT
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗猪IgG H&L
小鼠滑膜间充质干细胞Rabbit Anti-Pig IgG H&L / AP
FAM160B1蛋白抗体
TROVE2; TROVE 2; TROVE-2; 60 kDa ribonucleoprotein Ro; 60 kDa Ro protein; 60 kDa SS A/Ro ribonucleoprotein; 60 kDa SS-A/Ro ribonucleoprotein; Autoantigen Ro/SSA, 60-KD; bA101E13.2; Gastric cancer multi drug resistance protein; Ribonucleoprotein autoantigen SS A/Ro; RO 60; Ro 60 kDa autoantigen; RO60_HUMAN; RoRNP; Sjoegren syndrome antigen A2; Sjoegren syndrome type A antigen; Sjogren syndrome antigen A2 (60kD ribonucleoprotein autoantigen SS A/Ro); Sjogren syndrome antigen A2 (60kDa ribonucleoprotein autoantigen SS A/Ro); Sjogren syndrome antigen A2; SS A; SS-A; SS-A/Ro; SSA 2; SSA; SSA2; TROVE domain family member 2; TROVE2.
小鼠肌腱成纤维细胞
兔食管成纤维细胞
MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞
HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；