细胞简介:
小鼠角膜上皮细胞分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下:①角膜是的无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞;②角膜上皮细胞能参与先天性,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统;③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和对细胞生长的影响。
组织来源
产品规格
货号
用途
眼角膜组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1970
仅供科研研究实验
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的小鼠角膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠角膜上皮细胞经PCK荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死; (2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
MMP-1ELISAkit
猴子白介素15(IL-15)elisa分析检测试剂盒
IL-15 ELISA Kit
人肺炎衣原体抗体IgA(Cpn-IgA)elisa分析检测试剂盒
HumanCpn-IgAELISAKit
小鼠心肌营养素1(CT1)elisa检测试剂盒
大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)elisa检测试剂盒
组织结合(酯化)酶连续循环荧光定量检测试剂盒
山羊α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa检测试剂盒
六磷酸肌醇激酶2抗体
IHPK2
α-1-酸性糖蛋白2抗体
Alpha 1 acid glycoprotein 2
小鼠兴奋性氨基酸转运蛋白2(EAAT2)elisa检测试剂盒
大鼠抗心磷脂抗体(ACA)elisa检测试剂盒
磷脂酰(phosphatidylcholine;PC)比色法定量检测试剂盒
山羊白介素12(IL-12/P40)elisa分析检测试剂盒
蛋白激酶C zeta 抗体
PKC zeta
单核细胞趋化蛋白4抗体
CCL13
肿瘤血管内皮标志物8抗体 Anti-TEM8
富含脯氨酸/丝氨酸卷曲螺旋蛋白1抗体 Anti-PSRC1
骨骼肌细胞线粒体膜蛋白PARL抗体 Anti-PARL
分选连接蛋白1抗体 Anti-SNX1/Sorting nexin1
PE-CY5标记的羊抗鸡IgG H&L
小鼠角膜上皮细胞Goat Anti-Chicken IgG H&L / PE-Cy5
神经突起生长诱导因子受体UNC5D抗体
PKA R2; KAP2; KAP2_HUMAN; MGC3606; PKR 2; PKR2; PRKA R2; PRKAR 2; PRKAR2; Protein kinase A RII alpha subunit; Protein kinase cAMP dependent regulatory type II alpha; cAMP dependent protein kinase regulatory subunit alpha 2; cAMP dependent protein kinase regulatory subunit RII alpha; cAMP dependent protein kinase type II alpha regulatory chain; cAMP dependent protein kinase type II alpha regulatory subunit; cAMP-dependent protein kinase type II-alpha regulatory subunit;
小鼠结肠成纤维细胞
兔肾近端小管上皮细胞
NCTC1469(NCTC CLONE 1469)小鼠正常肝细胞
HuTu 80人十二指肠腺癌细胞